[发明专利]可诱导肿瘤细胞程序性坏死的蛋白及其制备方法和应用有效
申请号: | 201710354026.X | 申请日: | 2017-05-18 |
公开(公告)号: | CN107011420B | 公开(公告)日: | 2020-06-12 |
发明(设计)人: | 崔晓东;王转花;王茹 | 申请(专利权)人: | 山西大学 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/18;C07K1/16;A61K38/16;A61P35/00 |
代理公司: | 山西五维专利事务所(有限公司) 14105 | 代理人: | 张福增 |
地址: | 030006 山*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 诱导 肿瘤 细胞 程序性 坏死 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种可诱导肿瘤细胞程序性坏死的蛋白,其特征在于,氨基酸序列为SEQ ID No.1。
2.如权利要求1所述的可诱导肿瘤细胞程序性坏死的蛋白的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
第一步:取干燥的黍子籽粒或黍糠,进一步粉碎后,然后按每克粉末加入10-15mL预冷的酸性蛋白提取液,4℃下搅拌4-8小时,8000-12000rpm离心10-20分钟除去沉淀,收集上清,得到蛋白粗提液;
第二步:在蛋白粗提液中加入硫酸铵,至60%-80%的饱和度,在4℃搅拌3-5小时;8000-12000rpm离心20-30分钟,收集沉淀;
第三步:用少量pH7.0的磷酸盐缓冲液溶解沉淀,上样于脱盐柱,除去硫酸铵,收集蛋白峰得到蛋白粗品;
第四步:将蛋白粗品上样于HiTrapTM SP弱阳离子交换进行分离纯化,收集洗脱峰,将收集的洗脱峰蛋白上样于凝胶层析柱,收集活性蛋白峰,真空冷冻干燥,得到可以诱导肿瘤细胞程序性坏死的蛋白。
3.如权利要求2所述的可诱导肿瘤细胞程序性坏死的蛋白的制备方法,其特征在于,所述的酸性蛋白提取液为20mmol/L醋酸铵缓冲液,pH4.5。
4.如权利要求1所述的可诱导肿瘤细胞程序性坏死的蛋白在制备抗肿瘤药物中的应用。
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