[发明专利]一种用于检测德尔卑沙门氏菌的靶基因、特异性引物对及检测方法和试剂盒有效
| 申请号： | 201710354984.7 | 申请日： | 2017-05-19 |
| 公开（公告）号： | CN107164472B | 公开（公告）日： | 2020-11-17 |
| 发明（设计）人： | 翟立公;王俊颖;王蓓蓓;王丽;郭元新;杨剑婷;杜传来 | 申请（专利权）人： | 安徽科技学院 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/42 |
| 代理公司： | 合肥汇融专利代理有限公司 34141 | 代理人： | 张雁 |
| 地址： | 233100 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 德尔卑 沙门氏菌 基因 特异性 引物 方法 试剂盒 | ||
1.一种检测德尔卑沙门氏菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、提取样品DNA，采用特异性引物对SD1、SD2、SD3、SD11、SD12，分别进行PCR扩增，所述样品来自食品，其中
SD1-f：核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示，SD1-r：核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；
SD2-f：核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，SD2-r：核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；
SD3-f：核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示，SD3-r：核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；
SD11-f：核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示，SD11-r：核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示；
SD12-f：核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示，SD12-r：核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示；
S2、凝胶电泳检测扩增产物；
S3、比较电泳后条带，若在171bp、164bp、512bp、608bp和296bp位置有条带，则样品中含有德尔卑沙门氏菌。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增过程中，25μlPCR反应体系包含有2×Master 12.5μl，10μM引物对1μl，模板取1-5μl，补ddH2O至25μl。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述凝胶电泳采用琼脂糖凝胶电泳。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：以25μlPCR反应体系计量，对于权利要求1所述的SD1、SD2、SD3、SD11和SD12引物，需要德尔卑沙门氏菌总DNA浓度≥2.685ng/μl。
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