[发明专利]一种马克斯克鲁维酵母菌冻干菌剂的制备方法及其用途有效
申请号: | 201710355851.1 | 申请日: | 2017-05-19 |
公开(公告)号: | CN107034149B | 公开(公告)日: | 2020-04-28 |
发明(设计)人: | 刘朋龙;王亮;胡曼;刘让;胡刚;尤宏;罗晓红;詹涛;李阳 | 申请(专利权)人: | 新疆天润生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/16 | 分类号: | C12N1/16;C12N1/04;C12C12/00;C12C5/00;C12R1/645 |
代理公司: | 乌鲁木齐中科新兴专利事务所(普通合伙) 65106 | 代理人: | 李静 |
地址: | 830088 新疆维吾尔自治区乌*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 马克 克鲁 酵母菌 冻干菌剂 制备 方法 及其 用途 | ||
1.一种马克斯克鲁维酵母菌冻干菌剂的制备方法,其特征在于所述马克斯克鲁维酵母菌(Kluyveromyces marxianus var. marxianus),已于2010年4月27日保藏于中国微生物菌种管理委员会普通微生物中心,简称CGMCC,保藏号:CGMCC NO.3781,菌株编号:A3,具体操作按下列步骤进行:
高密度培养:
a、种子液体的制备:将马克斯克鲁维酵母菌划线于YEPD培养基平板上,放置温度28-30℃培养箱中培养1-2天,挑取饱满的菌种再次划线于YEPD培养基平板上,放置温度28-30℃培养箱中培养1-2天后再将菌种接入YEPD液体培养基中,温度28-30℃,160-180r/min摇瓶培养过夜,得到种子液;
b、发酵培养基的配制:称取蔗糖67.37g,酵母浸粉29.7g,玉米浆15.61g,磷酸二氢钾4.13g,硫酸镁0.3g,溶于1L蒸馏水中,混合均匀后,温度121℃灭菌20min;
c、高密度发酵培养:将步骤a制得的种子液接入步骤b灭菌冷却后的发酵培养基中,接种量为3×106cfu/mL,培养的温度28-30℃,160-180r/min,摇瓶培养16h后终止发酵,得到高密度的马克斯克鲁维酵母菌发酵菌液;
真空冷冻干燥法制备冻干菌剂:
d、离心浓缩:将步骤c制得的高密度马克斯克鲁维酵母菌发酵菌液在温度4℃,6000r/min的条件下离心15min,倒掉上清液,得到马克斯克鲁维酵母菌活性菌泥;
e、保护剂的制备:配制浓度为20-100g/L的麦芽糖,温度121℃灭菌20min;配制30-120g/L浓度的脱脂奶粉,温度115℃,灭菌15min,再将配制的两种保护剂冷却后按体积比1:1进行混合,得到复合保护剂;
f、真空冷冻干燥:将步骤d制备的马克斯克鲁维酵母菌活性菌泥与步骤e得到的复合保护剂按体积比1:1充分混合,置于温度-80℃冰箱中预冻3h后,在冷阱温度-40℃,真空度10帕下真空冷冻干燥24h,即得到马克斯克鲁维酵母的冻干菌剂。
2.根据权利要求1所述方法获得的马克斯克鲁维酵母的冻干菌剂在制备发酵食品添加剂中的用途。
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