[发明专利]一种用于绝对定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的ddPCR方法、引物及其应用和试剂盒

权利要求书

1.一种用于绝对定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的ddPCR方法，其特征在于，其包括：

将PCR预混液形成微滴，并进行ddPCR反应；

其中，所述PCR预混液含有SEQ ID NO:1所示的正向引物和SEQ ID NO:2所示的反向引物。

2.根据权利要求1所述的用于绝对定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的ddPCR方法，其特征在于，所述正向引物和所述反向引物在所述PCR预混液中的浓度均为120-130nM。

3.根据权利要求2所述的用于绝对定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的ddPCR方法，其特征在于，所述正向引物和所述反向引物在所述PCR预混液中的浓度均为124-126nM。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的用于绝对定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的ddPCR方法，其特征在于，所述ddPCR反应的退火温度为52-60℃。

5.根据权利要求1-3中任一项所述的用于绝对定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的ddPCR方法，其特征在于，所述ddPCR反应的反应程序为：94-96℃预变性4-6分钟；94-96℃变性8-10秒钟，54-56℃退火28-32秒钟，70-74℃延伸28-32秒钟，共38-42个循环；70-74℃总延伸4-6分钟；96-99℃，8-12分钟。

6.一种用于绝对定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的引物，其特征在于，其包括SEQ ID NO:1所示的正向引物和SEQ ID NO:2所示的反向引物。

7.权利要求6所述的用于绝对定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的引物在猪繁殖与呼吸综合征病毒的绝对定量检测中的应用。

8.权利要求6所述的用于绝对定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的引物在猪繁殖与呼吸综合征病毒的早期诊断和/或防疫中的应用。

9.一种用于绝对定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的试剂盒，其特征在于，其包括权利要求6所述的用于绝对定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的引物。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：ddPCR Supermix、ddH₂O、阳性标准品和微滴生成油中的一种或多种。