[发明专利]一种检测CALR基因2型突变的引物组合物及试剂盒有效
申请号: | 201710364251.1 | 申请日: | 2017-05-22 |
公开(公告)号: | CN107164474B | 公开(公告)日: | 2020-09-04 |
发明(设计)人: | 关明;曹国君;方雪恩;唐宜桂;许笑;孔继烈;张心菊;李杨 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属华山医院;复旦大学;上海速创诊断产品有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人: | 竺路玲 |
地址: | 200040 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 calr 基因 突变 引物 组合 试剂盒 | ||
1.一种检测CALR基因2型突变的试剂盒,其特征在于,包括SEQ ID NO:2-SEQ ID NO:7所示序列的引物组合物。
2.根据权利要求1所述的检测CALR基因2型突变的试剂盒,其特征在于,还包括反应缓冲液、Bst DNA聚合酶、钙黄绿素、去离子水。
3.一种用于非诊断和非治疗目的的检测CALR基因2型突变的方法,其特征在于,以被测样本的DNA模板,采用权利要求1所述的试剂盒配制反应体系并进行LAMP反应,然后进行可视化判读来鉴定样本是否为CALR基因2型突变阳性。
4.根据权利要求3所述的检测CALR基因2型突变的方法,其特征在于,所述LAMP反应的条件为:65℃,60min。
5.根据权利要求3所述的检测CALR基因2型突变的方法,其特征在于,所述反应体系包括2×反应缓冲液12.5μL,SEQ ID NO:2~SEQ ID NO:4所示序列中的每一引物各0.5μL,SEQID NO:5~SEQ ID NO:7所示序列中的每一引物各1μL,Bst DNA聚合酶1μL,钙黄绿素1μL,去离子水4.0μL,DNA模板2μL。
6.根据权利要求5所述的检测CALR基因2型突变的方法,其特征在于,SEQ ID NO:2~SEQ ID NO:3所示序列中的每一引物的终浓度均为0.2μmol/L;
SEQ ID NO:4所示序列的引物的终浓度均为0.8μmol/L;
SEQ ID NO:5所示序列的引物的终浓度均为1.6μmol/L;
SEQ ID NO:6~SEQ ID NO:7所示序列中的每一引物的终浓度均为0.8μmol/L。
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