[发明专利]一种用于不贴壁细胞免疫染色的染色管及染色方法

说明书

本发明涉及一种用于不贴壁细胞免疫染色的染色管及染色方法，所述染色管设有外管、内管和密封盖；所述外管设有外管管体；所述内管设有底面为开口状的内管管体、支撑台和滤膜，所述滤膜孔径为0.5‑1.5μm且外缘固定在内管管体上，所述内管管体设有隔离管体和染色管体，且侧壁上设有通气窗；所述密封盖设有连接部和盖体；装配状态下，所述内管管体套接在外管管体内，所述支撑台被外管管体的上端面支撑住，所述隔离管体使染色管体与外管管体之间留有间隙，所述通气窗连通内管管体与所述间隙。所述的染色方法即使用所述染色管进行细胞免疫染色。本发明优点在于：染色效果好，结果可靠，操作简单，操作过程中不会造成细胞丢失，染色管结构简单，成本低，便于推广应用。

技术领域

本发明涉及一种生物实验器械和方法，具体地说，涉及一种用于不贴壁细胞免疫染色的染色管及染色方法。

背景技术

细胞免疫染色是指用标记(一般采用荧光、冷光物质或者酶标记)的抗体对细胞或组织内的相应的抗原进行定性、定位或定量检测。不贴壁细胞由于漂浮在液体中很难进行免疫染色，一般使用细胞甩片的方法固定于玻片上才能进行免疫组织化学或免疫荧光染色，而甩片过程会影响细胞的自然形态，可能导致染色结果不准确。

中国专利文献CN102288471A，公开日2011.12.21，公开了一种悬浮细胞的免疫荧光染色方法，所述的染色方法包括以下步骤：先收集细胞于离心管中，800g离心收集细胞，然后分别加入多聚甲醛固定、Triton-X100通透、1％BSA封闭，再依次加入一抗、二抗孵育，以上每步操作后都采用800g离心的方法进行洗涤，最后DAPI染色后，滴至载玻片上封片观察。该发明优点在于免疫荧光染色的过程均在离心管中进行，避开了悬浮细胞难于爬片及试验过程容易脱落的问题，染色结果较好。

然而本申请发明人在长期的实验过程中，经过细致观察和总结，发现上述方法仍然存在一些弊端：1)离心过程中，细胞和处理溶液有较长时间的接触，处理溶液过长时间接触可能对染色结果产生不良影响；2)离心后处理溶液并不能被完全倒除，残余的处理溶液可能影响下一步的处理效果；3)经离心后细胞全部聚集于锥状的离心管管底，加入处理溶液后细胞很难全部与处理溶液充分接触；4)在移除处理溶液的过程中，难以保证细胞不被带出，造成细胞数量的损失；5)细胞由DAPI染色后需要转移到载玻片上封片观察，操作繁琐。以上弊端将直接影响染色效果和结果的准确性，也给实验人员带来不便。

综上所述，亟需一种新的适用于不贴壁细胞的染色方法，以期获得更准确的染色结果和节省人力。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种用于不贴壁细胞免疫染色的染色管。

本发明的再一的目的是，提供一种用于不贴壁细胞的免疫染色方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

一种用于不贴壁细胞免疫染色的染色管，设有外管、内管和密封盖；所述的外管设有外管管体；所述的内管设有内管管体、支撑台和滤膜；所述的内管管体底面为开口状，内管管体包括隔离管体和位于隔离管体下方的染色管体，且内管管体的侧壁上设有通气窗；所述的支撑台位于内管管体的上端端面上，且外径大于内管管体的外径；所述的滤膜孔径为0.5-1.5μm且外缘固定在内管管体的内壁上；所述的密封盖设有连接部和盖体，所述的连接部一端连接外管，另一端连接盖体；装配状态下，所述的内管管体套接在外管管体内，所述的支撑台由外管管体的上端面支撑住，所述的隔离管体使染色管体与外管管体之间留有间隙，所述的通气窗连通内管管体与所述间隙，所述的盖体卡扣在内管管体上。

所述的透气窗设于隔离管体上。

所述的隔离管体为由上至下直径逐渐缩小的圆台柱状。

所述的透气窗围绕内管的纵向中心轴呈对称辐射状排布。

所述的外管管体的上端端面设有支撑台面，所述的支撑台面的外径大于外管管体的外径；装配状态下，所述的支撑台由所述支撑台面支撑住。