[发明专利]一种从富硒大豆中富集高硒蛋白组分的方法

说明书

技术领域

本发明涉及大豆蛋白提取技术领域，具体涉及一种从富硒大豆中富集高硒蛋白组分的方法。

背景技术

1998年，中国正式实施“国家大豆行动计划”，积极推动大豆产业的发展。大豆营养丰富，特别是蛋白质中氨基酸组成经FAO/WHO氨基酸评分与动物蛋白相当，按沉降系数可将大豆蛋白分为2S、7S、11S、15S，其在大豆蛋白中所占比例分别为8％、35％、52％、5％，即7S、11S两种蛋白占比之和接近90％。目前，大豆已成为世界各国的重要食品和发展畜牧业的重要蛋白质资源。因此，对大豆进行合理科学的开发利用具有重要意义。富硒大豆是指大豆中硒含量高于0.02-0.3mg/kg的大豆。1973年，世界卫生组织(WHO)和国际营养组织确认硒是人和动物体内必需的微量元素之一。大量研究表明很多种疾病都与硒缺乏密切相关，现已确认与硒缺乏相关的疾病达40余种，其中甚至包括癌症、SARS和艾滋病。后续又有诸多文献报道硒具有提高机体抵御氧化损伤能力、提高机体免疫力、预防肿瘤及降低癌症发病率等功效。然而，硒资源的分布却严重地不平衡。在中国的1094个县市中，土壤硒含量达到国际公布正常临界值(0.1mg/kg)的县只有1/3。其中含量小于或等于0.02mg/kg的占29％，为严重缺硒地区。将大豆蛋白这一重要蛋白资源与硒结合，在增加了大豆产业附加值，同时也有助于解决硒资源分布不平衡的问题。

已有文献报道大豆中蛋白的分离方法，例如Thanh采用Tris-HCl缓冲液提取大豆中的11S和7S蛋白；Wolf、Roberts and Briggs、Eldridge and Wolf、Koshiyama也先后尝试不同方法提取大豆蛋白，但他们均未对富硒大豆蛋白提取进行研究，并且关于大豆蛋白中硒提取率的研究尚未有人报道。

发明内容

为了解决上述现有技术存在的问题，本发明提供了一种从富硒大豆中富集高硒蛋白组分的方法，该方法简单易操作，且可有效地富集高硒蛋白组分，适合于工业化生产。

实现本发明上述目的所采用的技术方案为：

一种从富硒大豆中富集高硒蛋白组分的方法，包括如下步骤：

1、富硒大豆的脱脂：

将干燥的富硒大豆籽粒粉碎，得到富硒大豆粉，按照液料比为1g:20-30ml的比例，将石油醚加入富硒大豆粉中，室温下密封搅拌浸提脱脂2-4h，脱脂结束后静置，待沉淀完全后，分离，将所得的沉淀干燥去除石油醚，得到脱脂豆粉；

2、去除脱脂豆粉中的非蛋白组分：

按照料液比为1g:25-35ml的比例，将脱脂豆粉加入0.01-0.05mol/L磷酸氢二钠溶液中，室温下搅拌浸提45-90min，浸提结束后，离心分离，取上清液A，即为大豆蛋白溶液；

3、提取11S大豆球蛋白：

向大豆蛋白溶液中加入NaCl，使NaCl的终浓度为45-55mmol/L，用0.5-1.5mol/L的盐酸溶液调节pH至6-6.5后，离心分离，得沉淀A和上清液B，沉淀A即为11S大豆球蛋白；

4、去除11S大豆球蛋白和7S大豆球蛋白以外的蛋白质组分：

将步骤3所得的上清液B用0.5-1.5momol/L的盐酸溶液调节pH至5-5.5后，离心分离，得沉淀B和上清液C，沉淀B即为11S大豆球蛋白和7S大豆球蛋白以外的蛋白质组分；

5、提取7S大豆球蛋白：

将步骤4所得的上清液C用0.5-1.5momol/L的盐酸溶液调节pH至4.5-5后，离心分离，得沉淀C，沉淀C即为7S大豆球蛋白。

进一步，将步骤1分离所得的上清液回收石油醚进行循环利用。

进一步，离心分离时离心转速3000-3500r/min，离心时间为10min。

进一步，步骤3中，加入NaCl，使NaCl的终浓度为50mmol/L。

进一步，盐酸溶液的浓度为1mol/L。

进一步，步骤3中，用盐酸溶液调节pH至6.4。

进一步，步骤4中，将步骤3所得的上清液B用盐酸溶液调节pH至5.25.

进一步，步骤5中，将步骤4所得的上清液C用盐酸溶液调节pH至4.8。

与现有技术相比，本发明的优点与有益效果在于：