[发明专利]Clean‑CL纯化试剂盒及其应用在审
申请号: | 201710366972.6 | 申请日: | 2017-05-23 |
公开(公告)号: | CN107236726A | 公开(公告)日: | 2017-10-10 |
发明(设计)人: | 王金龙;张瑞;吕灵双;石太平;宋金良;刘如银 | 申请(专利权)人: | 北京创新乐土基因科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 102206 北京市昌*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | clean cl 纯化 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种磁珠纯化试剂,是将羧酸盐磁珠Speed Bead Magnetic Carboxylate Modified Particles、Tris-HCL溶液、EDTA溶液、氯化钠、聚乙二醇和水混匀得到的溶液。
2.根据权利要求1所述的试剂,其特征在于:所述羧酸盐磁珠Speed Bead Magnetic Carboxylate Modified Particles、所述Tris-HCL溶液、所述EDTA溶液、所述氯化钠和所述聚乙二醇的配比为205ul:(80-120)ul:(15-25)ul:(1-1.3)g:(1.5-2.2)g。
3.根据权利要求2所述的试剂,其特征在于:所述羧酸盐磁珠Speed Bead Magnetic Carboxylate Modified Particles、所述Tris-HCL溶液、所述EDTA溶液、所述氯化钠和所述聚乙二醇的配比为205 ul:100 ul:20 ul:1.17g:1.8g。
4.根据权利要求2或3所述的试剂,其特征在于:
所述聚乙二醇为聚乙二醇11000;
或,所述Tris-HCL溶液的浓度为1M;
或,所述EDTA溶液的浓度为0.5M;
或,所述水为灭菌纯化水。
5.权利要求1-4中任一所述的磁珠纯化试剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)将羧酸盐磁珠Speed Bead Magnetic Carboxylate Modified Particles至于离心管中;向所述离心管中加入Tris-HCL溶液、EDTA溶液和水,混匀,得到体系甲;
(2)向所述体系甲中加入氯化钠和聚乙二醇,混匀,得到体系乙;
(3)向所述体系乙中加入水,混匀,孵育,得到磁珠纯化试剂。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:
所述羧酸盐磁珠Speed Bead Magnetic Carboxylate Modified Particles、所述Tris-HCL溶液、所述EDTA溶液、所述氯化钠和所述聚乙二醇的配比为205ul:(80-120)ul:(15-25)ul:(1-1.3)g:(1.5-2.2)g;
或,所述羧酸盐磁珠Speed Bead Magnetic Carboxylate Modified Particles、所述Tris-HCL溶液、所述EDTA溶液、所述氯化钠和所述聚乙二醇的配比具体为205ul:100 ul:20 ul:1.17g:1.8g。
7.根据权利要求5或6所述的方法,其特征在于:
所述聚乙二醇为聚乙二醇11000;
或,所述Tris-HCL溶液的浓度为1M;
或,所述EDTA溶液的浓度为0.5M;
或,所述水为灭菌纯化水。
8.根据权利要求5-7中任一所述的方法,其特征在于:所述羧酸盐磁珠Speed Bead Magnetic Carboxylate Modified Particles至于离心管之前还包括在室温放置的步骤;所述室温放置的时间为30分钟,且放置期间每10分钟涡旋振荡1分钟;
或,所述混匀的方法为振荡,所述振荡的时间具体为3min;
或,所述孵育的条件为8rpm孵育2小时。
9.一种纯化试剂盒,其包括权利要求1-4中任一所述的磁珠纯化试剂或权利要求5-8中任一所述的方法制备得到的磁珠纯化试剂。
10.权利要求1-4中任一所述的磁珠纯化试剂或权利要求5-8中任一所述的方法制备得到的磁珠纯化试剂或权利要求9所述的纯化试剂盒在如下1)-4)中任一种所述的应用:
1)核酸纯化;
2)文库构建;
3)PCR体系纯化;
4)酶切和连接反应体系纯化。
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