[发明专利]一种与凡纳滨对虾耐低盐性状相关的SNP标记、扩增引物及其应用有效
申请号: | 201710369451.6 | 申请日: | 2017-05-23 |
公开(公告)号: | CN107012255B | 公开(公告)日: | 2020-06-02 |
发明(设计)人: | 任春华;江晓;陈廷;黄文;胡超群 | 申请(专利权)人: | 中国科学院南海海洋研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11;C12N15/55 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 刘明星 |
地址: | 510301 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 凡纳滨 对虾 低盐 性状 相关 snp 标记 扩增 引物 及其 应用 | ||
1.一种与凡纳滨对虾耐低盐性状相关的SNP标记的扩增引物,其特征在于,包括以下引物:
Lv-F:5’-TGATGAGCACAAGGTCCCA-3’;
Lv-R:5’-GAGAAACCACCGAAGAGG-3’。
2.权利要求1所述的与凡纳滨对虾耐低盐性状相关的SNP标记的扩增引物在凡纳滨对虾分子标记辅助育种中的应用。
3.一种耐低盐凡纳滨对虾品种的选育方法,其特征在于,包括以下步骤:
a、提取待测凡纳滨对虾基因组DNA;
b、采用权利要求1所述的扩增引物Lv-F和Lv-R对待测凡纳滨对虾基因组DNA进行PCR扩增;
c、对扩增产物进行测序,确定权利要求1所述的SNP标记的基因型,选择TT基因型的个体作为后备亲本进行耐低盐凡纳滨对虾品种育种。
4.根据权利要求3所述的选育方法,其特征在于,所述的PCR扩增,其反应体系为25μL,包括:不含Mg2+的10×PCR buffer 2.5μL、25mM MgCl2 2.0μL,10mM dNTP 0.5μL、5U/μL HSDNA Polymerase 0.2μL、10μM正向引物0.5μL、10μM反向引物0.5μL、DNA模板12.5ng,其余由无菌水补足至25μL。
5.根据权利要求3或4所述的选育方法,其特征在于,所述的PCR扩增,其反应程序为:95℃预变性3分钟;95℃变性30秒,55℃退火30秒,72℃延伸1分钟,共35个循环;72℃再延伸10分钟。
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