[发明专利]一种与凡纳滨对虾耐低盐性状相关的SNP标记、扩增引物及其应用有效

专利信息
申请号: 201710369451.6 申请日: 2017-05-23
公开(公告)号: CN107012255B 公开(公告)日: 2020-06-02
发明(设计)人: 任春华;江晓;陈廷;黄文;胡超群 申请(专利权)人: 中国科学院南海海洋研究所
主分类号: C12Q1/6888 分类号: C12Q1/6888;C12N15/11;C12N15/55
代理公司: 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 代理人: 刘明星
地址: 510301 *** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 凡纳滨 对虾 低盐 性状 相关 snp 标记 扩增 引物 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种与凡纳滨对虾耐低盐性状相关的SNP标记的扩增引物,其特征在于,包括以下引物:

Lv-F:5’-TGATGAGCACAAGGTCCCA-3’;

Lv-R:5’-GAGAAACCACCGAAGAGG-3’。

2.权利要求1所述的与凡纳滨对虾耐低盐性状相关的SNP标记的扩增引物在凡纳滨对虾分子标记辅助育种中的应用。

3.一种耐低盐凡纳滨对虾品种的选育方法,其特征在于,包括以下步骤:

a、提取待测凡纳滨对虾基因组DNA;

b、采用权利要求1所述的扩增引物Lv-F和Lv-R对待测凡纳滨对虾基因组DNA进行PCR扩增;

c、对扩增产物进行测序,确定权利要求1所述的SNP标记的基因型,选择TT基因型的个体作为后备亲本进行耐低盐凡纳滨对虾品种育种。

4.根据权利要求3所述的选育方法,其特征在于,所述的PCR扩增,其反应体系为25μL,包括:不含Mg2+的10×PCR buffer 2.5μL、25mM MgCl2 2.0μL,10mM dNTP 0.5μL、5U/μL HSDNA Polymerase 0.2μL、10μM正向引物0.5μL、10μM反向引物0.5μL、DNA模板12.5ng,其余由无菌水补足至25μL。

5.根据权利要求3或4所述的选育方法,其特征在于,所述的PCR扩增,其反应程序为:95℃预变性3分钟;95℃变性30秒,55℃退火30秒,72℃延伸1分钟,共35个循环;72℃再延伸10分钟。

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