[发明专利]一种细菌微流控集成检测的方法

权利要求书

1.一种非疾病的诊断目的的细菌微流控集成检测的方法，其特征是，包括以下步骤：增菌过程管道化、DNA提取过程管道化和PCR反应过程管道化；

所述增菌过程管道化包括以下步骤：配制增菌基质，然后将增菌基质填装入细管中；

所述DNA提取过程管道化包括以下步骤：将DNA提取液填装入细管中，然后用密封膜密封细管两端；

所述PCR反应过程管道化包括以下步骤：将PCR反应试剂填装入细管中；

将增菌过程管道化中的细管一端插入样本增菌液中进行增菌；增菌结束后，采用传动装置驱动取菌针环，将增菌过程管道化的细管中的菌液转移至DNA提取过程管道化的细管中；所述菌液在DNA提取过程管道化中的细管中进行DNA提取；提取结束后，采用注射泵将DNA提取过程管道化的细管中的提取液转移至PCR反应过程管道化的细管中进行PCR反应；PCR反应结束后，荧光实时检测或通过电泳检测目标产物。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述增菌基质为含有选择性增菌剂和营养物质的半固体凝胶，或者是，所述增菌基质为大孔吸附材料和含有选择性增菌剂的培养基。

3.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述DNA提取过程管道化包括以下步骤：将溶菌酶和DNA提取液填装入细管中，然后用密封膜密封细管两端。

4.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述PCR反应过程管道化包括以下步骤：将PCR反应试剂和荧光检测试剂填装入细管中。

5.如权利要求1所述的方法，其特征是：还包括使用增菌培养控温系统实现原位增菌培养。

6.如权利要求1所述的方法，其特征是：还包括使用DNA提取控温系统实现原位DNA提取。

7.如权利要求1所述的方法，其特征是：还包括使用PCR反应控温系统实现原位PCR反应。

8.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述方法使用的细菌微流控集成检测的装置包括：微型管道集成系统、微流控系统和控制系统；

其中，所述微型管道集成系统包括取菌针环、增菌细管、DNA提取管和PCR反应管；

沿增菌细管长度方向上且在增菌细管的上部设置第一连接管，在增菌细管的下部、与第一连接管相对的位置处设置第二连接管，所述第二连接管通过DNA提取管与PCR反应管相连接；所述取菌针环位于第一连接管内且位于增菌细管上方；

所述微流控系统包括传动装置和注射泵；

所述控制系统用于控制传动装置以驱动取菌针环穿过增菌细管取菌液后达到DNA提取管，所述控制系统还用于控制注射泵以将DNA提取管中的设定量的液体转移到PCR反应管中。

9.如权利要求8所述的方法，其特征是：所述第一连接管的顶端采用密封膜密封。

10.如权利要求8所述的方法，其特征是：第一连接管与增菌细管的接触部位采用密封膜密封。

11.如权利要求8所述的方法，其特征是：所述增菌细管与第二连接管的接触部位采用密封膜密封。

12.如权利要求8所述的方法，其特征是：第二连接管与DNA提取管的连接处采用密封膜密封。

13.如权利要求8所述的方法，其特征是：所述第二连接管上设有气压平衡孔，以微孔滤膜封孔。

14.如权利要求8所述的方法，其特征是：所述取菌针环是由柄基、接种环和针状部件依次相连构成的。

15.如权利要求14所述的方法，其特征是：所述针状部件为针。

16.如权利要求14所述的方法，其特征是：所述取菌针环的柄基顶端与传动装置相连。