[发明专利]一种用于检测花青素的分子印迹传感器的制备方法

说明书

本发明公开了一种用于检测花青素的分子印迹传感器的制备方法，特征在于，首先玻碳电极用氧化石墨烯修饰。然后，在反应器中加入，去离子水：15~20%，无水乙醇：50~60%，二甲基丙烯酸乙二醇酯：6~10%，乌头酸：5~8%，1‑丙烯基‑3‑甲基咪唑溴盐：10~15%，偶氮二异庚腈：1.0~3%，花青素：0.2~2.0%，无氧氛围，55±2℃搅拌反应12~15 h，将得到的产物用乙醇：乙酸体积比为8:1混合溶液浸泡6~8 h，除去模板分子，干燥，即得花青素分子印迹聚合物；再将花青素分子印迹聚合物滴涂到氧化石墨烯修饰上，得到花青素的分子印迹传感器。该传感器具有高的亲和性和选择性。具有灵敏度高、特异性好、检测快速，可反复使用。

技术领域

本发明涉及的是一种分子印迹传感器的制备方法及快速检测应用技术领域，特别涉及一种用于检测花青素的分子印迹传感器的制备，具体是基于分子印迹特异性识别作用，用于检测药品、食品、生物样品中的花青素技术。

背景技术

花青素(Anthocyanidin)，又称花色素，其分子式为C15H11O6，相对分子质量为287，是自然界一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，属类黄酮化合物。也是植物花瓣中的主要呈色物质，水果、蔬菜、花卉等五彩缤纷的颜色，大部分与之有关。

花青素存在于植物细胞的液泡中，可由叶绿素转化而来。在植物细胞液泡不同的pH值条件下，使花瓣呈现五彩缤纷的颜色。秋天可溶糖增多，细胞为酸性，在酸性条件下呈红色或紫色，所以花瓣呈红、紫色是花青素作用，花青素的颜色受许多因子的影响，低温、缺氧和缺磷等不良环境也会促进花青素的形成和积累。

花青素为人体带来多种益处。从根本上讲，花青素是一种强有力的抗氧化剂，它能够保护人体免受一种叫做自由基的有害物质的损伤。花青素是羟基供体，同时也是一种自由基清除剂，它能和蛋白质结合防止过氧化。也和金属、Vc等螯合，防止Vc过氧化，也能淬灭单线态氧。花青素能与金属离子螯合或形成花青素一金属—Vc复合物。有助于预防多种与自由基有关的疾病，包括癌症、心脏病、过早衰老和关节炎；增强免疫系统能力来抵御致癌物质；具有抗炎功效，因而可以预防包括关节炎和肿胀在内的炎症；增强动脉、静脉和毛细血管弹性等。目前，检测花青素的方法主要有高效液相色谱、液相色谱-质谱，色谱法的准确度受到一定限制、而且仪器比较贵需要专业人员操作，也限制了其应用。也可用分光光度计快速测定，在碱性条件下呈蓝色，其颜色受酸度影响很大，给光度分析带来较大误差。另外，由于花青素与黄酮类分子结构十分相近很难分开，测定时互相干扰，准确检测花青素很困难。因此，找到一种选择性好、灵敏度高、操作简便使用的检测花青素的方法十分有意义。

分子印迹技术是当前开发具有分子识别功能的高选择性材料的主要方法之一，它是通过在模板分子周围形成一个高度交联的刚性高分子，除去模板分子后在分子印迹聚合物的网络结构中留下具有结合能力的识别位点，对模板分子表现出高选择识别性能的一种技术。这项技术以其构效预定性和特异识别性越来越受到人们的关注，已经成功用于固相萃取或微固相萃取，亲和色谱或毛细管电泳及传感器等领域。

依据此技术制备的分子印迹传感器，应用于药物分析、环境保护及生命科学研究中起着十分重要的作用。将功能分子以适当方式修饰到电极上，制备选择性好、灵敏度高、有一定使用寿命可再生的电化学传感器成为分析科学工作者努力探索的课题。但是传统的印迹方法所制备的印迹膜厚度难以控制，高交联度使得电子传递速度和响应慢、检测下限高而且再生和可逆性差，影响分子印迹技术在电化学传感器中的应用。因此，建立一种灵敏、快速、简便、特异性高、重复性好经济使用的检测方法，对研究人员、生产企业、质控人员、进出口商检、政府管理部门等的迫切需要的，对食品、药品、环境安全中的花青素含量准确定量测定十分必要，对于花青素生产和药理研究也具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是将分子印迹与电化学传感器相结合，提供了一种花青素分子印迹传感器的制备方法，主要是以花青素为模板，在玻碳电极表面通过氧化石墨烯、纳米金粒子的修饰，提高了传感器的灵敏度，采用滴涂法制制备花青素分子印迹传感器。