[发明专利]一种P蛋白突变构建的基因VII型新城疫病毒弱毒株

权利要求书

1.一种弱毒株，其特征在于，所述的弱毒株是将VII型新城疫病毒的P蛋白的237位和240位的氨基酸分别突变为苏氨酸T和异亮氨酸I，再通过反向遗传操作方法来构建的；

所述的反向遗传操作方法，其包括如下的步骤：

构建表达T7 RNA聚合酶的细胞系、

提供基因VII型新城疫病毒NDV拯救过程中需要的三个辅助重组质粒和一个全基因组重组载体，三个辅助重组质粒分别包含NDV的NP蛋白、P蛋白和L蛋白基因；其中P蛋白的237位和240位的氨基酸分别为T和I；

将三个辅助重组质粒和一个全基因组重组载体转入到表达T7 RNA聚合酶的细胞系中，培养获得基因VII型新城疫病毒弱毒株；

所述的弱毒株的保藏编号为CCTCC NO:V201710。

2.如权利要求1所述的弱毒株，其特征在于，所述的细胞系，是将表达T7RNA聚合酶的基因与载体PCI-neo连接后转染DF1细胞获得的。

3.权利要求1-2任一项所述的弱毒株在制备疫苗中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的疫苗为灭活疫苗。

5.一种VII型新城疫疫苗，其特征在于，所述的疫苗的抗原为权利要求1-2任一项所述的弱毒株。