[发明专利]一种大规模制备动物富血小板血浆的方法在审
申请号: | 201710391020.X | 申请日: | 2017-05-27 |
公开(公告)号: | CN107375328A | 公开(公告)日: | 2017-11-24 |
发明(设计)人: | 王耀;袁金城;王成新;江晓 | 申请(专利权)人: | 海奥斯生物科技镇江有限公司 |
主分类号: | A61K35/16 | 分类号: | A61K35/16;A61K35/19 |
代理公司: | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙)32274 | 代理人: | 王云 |
地址: | 212446 江苏省镇*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 大规模 制备 动物 血小板 血浆 方法 | ||
1.一种大规模制备动物富血小板血浆的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)采血:对动物进行采血,将动物血液收集到离心瓶中,加入抗凝剂,使血液与抗凝剂充分混匀,避免凝血;其中抗凝剂占血液的体积比为4~7%,
(2)采好的血液在20-24℃条件下静置,得到抗凝血,所述抗凝血于2小时内进行离心分离;
(3)第一次离心:将步骤(2)得到的抗凝血移入15~50 mL无菌离心管,配平后放入离心机离心,离心的条件为:转速2300 ~2600rpm,时间15 ~18min,温度20-22℃;
(4)第二次离心:转移第一次离心后得到的上层及白膜层至15~50 mL无菌离心管中,配平后放入离心机离心,离心的条件为:转速3800 ~4100rpm,时间15 ~18min,温度20-22℃;
(5)分离PPP:上层1/2体积血浆为PPP;
(6)分离PRP:下层1/2体积血浆轻柔吹打混匀,为PRP。
2.根据权利要求1所述的大规模制备动物富血小板血浆的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述的抗凝剂为质量浓度为5%的柠檬酸钠溶液。
3.根据权利要求1所述的大规模制备动物富血小板血浆的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述的抗凝剂占血液的体积比为5%。
4.根据权利要求1所述的大规模制备动物富血小板血浆的方法,其特征在于,步骤(1)中,采血的具体步骤为:先取适量抗凝剂加入离心杯中,颠倒数次润湿内壁,对动物进行采血,将动物血液收集到离心瓶中,持续摇动离心瓶,然后加入剩余的抗凝剂充分混匀。
5.根据权利要求1所述的大规模制备动物富血小板血浆的方法,其特征在于,步骤(3)中,第一次离心分离的条件:转速2500 rpm,时间15 min,温度20℃。
6.根据权利要求1所述的大规模制备动物富血小板血浆的方法,其特征在于,步骤(4)中,第二次离心分离的条件:转速4000 rpm,时间15 min,温度20℃。
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