[发明专利]肿瘤免疫T细胞检测试剂盒和检测方法

权利要求书

1.一种肿瘤免疫T细胞检测试剂盒，包括基于SYBR-Green定量PCR扩增对人体外周血液T细胞中免疫相关靶基因进行PCR扩增以检测其特异定量表达的特异引物，所述免疫相关靶基因包括受体和配体相关靶基因、NK细胞相关靶基因以及关键细胞因子基因，

所述受体和配体相关靶基因包括：2B4、B7-1、B7-2、BTLA、C4A、CD4、CD8a、CD11b、CD11c、CD27、CD28、CD3D、CD3E、CD3G、CD40、CD40L、CD48、CD70、CD74、CD80、CD86、CD96、CD137、CD155、CD160、CD226、CD247、CEACAM1、CTLA4、FoxP3、Galectin3、Galectin9、GITR、GITRL、GP100、HHLA2、HVEM、KLRG-1、LAG3、LIGHT、MAGEA3、HLA-A、HLA-B、HLA-DRA、HLA-DRB1、MLANA、OX40、OX40L、PD1、PDL1、PDL2、TRA、TRB、TCF7、TIGIT、TIM1、TIM3、TRAV40、VISTA，与每个所述受体和配体相关靶基因所对应的特异引物的DNA序列如表1所示；

所述NK细胞相关靶基因包括：CD16、CD94、FAS、FASL、HLA-E、IL-2、IL-12、IL-15、KIR、MIC-A、NKG2A、NKG2D、TRAIL、TRAILR、ULBP1，与每个所述NK细胞相关靶基因所对应的特异引物的DNA序列如表2所示；

所述关键细胞因子基因包括：Granzyme B、IFN-gamma、IL-4、IL-5、IL6、IL10、IL13、Perforin、TGF-beta、TNF-alpha，与每个所述关键细胞因子基因所对应的特异引物的DNA序列如表3所示。

2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，还包括：

多孔PCR反应板，每对特异引物对应容纳于PCR反应板的一个孔，并且PCR反应板还包括至少一个空白阴性对照孔和至少一个看家基因孔，

其中空白阴性对照孔中不含任何特异引物，所述至少一个看家基因孔中含有与该看家基因所对应的特异引物。

3.根据权利要求2所述的检测试剂盒，PCR反应板的每个孔中均含有除人体外周血液T细胞cDNA外包括特异引物在内的PCR反应所需试剂。

4.根据权利要求2所述的检测试剂盒，所述看家基因包括：Beta-actin、PPIA、TBP、18S，与每个所述看家基因所对应的特异引物的DNA序列如表4所示。