[发明专利]具有益生菌活性的枯草芽孢杆菌菌株

说明书

本发明涉及新的具有产气荚膜梭菌(C.perfringens)强烈抑制作用的枯草芽孢杆菌(B.subtilis)菌株及其作为益生菌的用途。

枯草芽孢杆菌菌株作为饲料工业中的益生菌成分的用途是现有技术中公知的。益生菌(也称为“直接饲喂微生物”或“DFM”)的作用是通过支持有益细菌的生长和/或致病细菌生长的抑制以积极的方式影响肠道微生物区系。理想地，通过使用益生菌，使抗生素生长促进剂(APG)的使用变得多余。除此以外，理想的是益生菌满足更多功能，如帮助特定饲料成分的消化。

因此，鉴于现有技术的状况，需要以积极方式影响肠道微生物区系并且除此之外理想地满足至少一个其他功能的益生菌。

令人惊讶地，发现了根据本发明的细菌呈现出许多有利特征。除了抑制产气荚膜梭菌(是家禽主要的商业相关病原体)生长的能力外，特别地显示出了在胆汁的存在下非常高的繁殖速率并且以非常有效的方式帮助消化纤维素。

已经通过筛选天然产生的分离物鉴定了枯草芽孢杆菌DSM 32315。其已经依据国际承认用于专利程序目的的微生物保藏的布达佩斯条约以Evonik Degussa GmbH的名义依据上述保藏号于2016年5月12日保藏于DSMZ。

因此，本发明的第一个主题是选自以下组的枯草芽孢杆菌菌株和/或所述枯草芽孢杆菌菌株的制备物：

a)以DSM 32315保藏于DSMZ的枯草芽孢杆菌菌株；

b)以DSM 32315保藏的枯草芽孢杆菌菌株的突变株，具有菌株DSM 32315的所有鉴定特征，其中所述突变株优选与菌株DSM 32315具有至少95％，优选至少96，97或98％，更优选至少99或99.5％的DNA序列相同性；

c)(a)或(b)的制备物；

d)含有如(a)，(b)或(c)中所含的代谢产物的有效混合物的制备物。

以DSM 32315保藏于DSMZ的枯草芽孢杆菌菌株呈现出以下特征性的序列：

a)16S rDNA序列，与根据SEQ ID NO:1的多核苷酸序列具有至少99.5％，尤其是100％序列相同性；

b)yqfD序列，与根据SEQ ID NO:2的多核苷酸序列具有至少99.5％，尤其是100％序列相同性；

c)gyrB序列，与根据SEQ ID NO:3的多核苷酸序列具有至少99.5％，尤其是100％序列相同性；

d)rpoB序列，与根据SEQ ID NO:4的多核苷酸序列具有至少99.5％，尤其是100％序列相同性；

e)groEL序列，与根据SEQ ID NO:5的多核苷酸序列具有至少99.5％，尤其是100％序列相同性。

因此，本发明的再一个主题是枯草芽孢杆菌菌株或其制备物，特别是具有上述特征的枯草芽孢杆菌菌株，呈现至少一个，优选全部的以下特征：

a)16S rDNA序列与根据SEQ ID NO:1的多核苷酸序列具有至少99％，优选至少99.5％，更优选至少99.8或99.9％，尤其是100％序列相同性；

b)yqfD序列与根据SEQ ID NO:2的多核苷酸序列具有至少99％，优选至少99.5％，更优选至少99.8或99.9％，尤其是100％序列相同性；

c)gyrB序列与根据SEQ ID NO:3的多核苷酸序列具有至少99％，优选至少99.5％，更优选至少99.8或99.9％，尤其是100％序列相同性。

优选地，这个枯草芽孢杆菌菌株呈现出至少一个，更优选全部的以下进一步特征：

d)rpoB序列与根据SEQ ID NO:4的多核苷酸序列具有至少99％，优选至少99.5％，更优选至少99.8或99.9％，尤其是100％序列相同性；

e)groEL序列与根据SEQ ID NO:5的多核苷酸序列具有至少99％，优选至少99.5％，更优选至少99.8或99.9％，尤其是100％序列相同性。

因此，本发明的一个特别的主题还是枯草芽孢杆菌菌株，呈现以下特征：

a)根据SEQ ID NO:1的16S rDNA序列；

b)根据SEQ ID NO:2的yqfD序列；

c)根据SEQ ID NO:3的gyrB序列。

优选地，这个枯草芽孢杆菌菌株呈现以下进一步的特征：

d)根据SEQ ID NO:4的rpoB序列；

e)根据SEQ ID NO:5的groEL序列。