[发明专利]一种同时制备高纯度总黄酮醇苷和银杏内酯的方法

说明书

一种从银杏叶提取物中同时分离总黄酮醇苷和银杏内酯的方法，其特征是以银杏叶提取物为原料，经过聚酰胺、大孔树脂柱层析富集纯化，洗脱液浓缩后加入酯类溶液萃取，水洗有机相部分，静置分层，水相和有机相分别合并，回收溶剂，干燥，粉碎，即可同时得到高纯度的总黄酮醇苷和银杏内酯。本发明的方法可以保证从银杏叶提取物中同时分离出来的总黄酮醇苷纯度达到90％以上，转移率不低于65％，含银杏内酯A、B、C三者之和总量纯度不少于85％以上，内酯之和转移率不低于55％；含总银杏酸小于1mg/kg。本方法有机萃取和水洗相结合，可以快速、低成本的同时得到高纯度总黄酮醇苷和银杏内酯，有机溶剂残留低，致敏性物质很少或几乎没有。

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种同时制备总黄酮醇苷和银杏内酯的方法。

背景技术

银杏叶提取物的主要活性成分之一为黄酮类化合物，包括槲皮素(quercetin)、山柰酚(kaempferol)、异鼠李素(isorhamnetin)及黄酮醇苷(flavonol glycosides)等，且主要以黄酮醇苷形式存在，具有扩张冠状血管、降低血清胆固醇的作用。银杏内酯是银杏叶提取物中的另一类有效成分，包括银杏内酯A(C₂₀H₂₄O₉)、银杏内酯B(C₂₀H₂₄O₁₀)、银杏内酯C(C₂₀H₂₄O₁₁)等，具有抑制血小板聚集和神经保护作用。这两类成分是以舒血宁注射液为代表的银杏叶提取物制剂中的有效成分。

目前，银杏叶总黄酮醇苷的生产工艺主要有溶剂萃取法、超临界萃取法和树脂吸附法。其中超临界萃取法设备投入大，目前尚未工业化生产，国内银杏叶提取物的生产基本采用树脂吸附法，但存在操作复杂，生产周期长的缺点。银杏内酯多采用大孔树脂和(或)聚酰胺等树脂柱分离、CO2超临界萃取法、中压制备柱或液相制备、有机溶剂萃取等技术制备，对设备的要求高，且存在成本高、树脂残留、收率低等缺点。鉴于黄酮醇苷和银杏内酯具有独特的生理作用、药理作用和保健价值，使其成为近年来国内外研究的热点之一。因此，探索简单、低成本的分离纯化工艺已成为目前科研的方向和目标。

目前现有技术中可以同时制备总黄酮醇苷和银杏内酯的方法相对较少。公开号CN1335157A、CN103372034A、CN102416027A以银杏叶为起始物料，通过提取、过聚酰胺柱(或大孔树脂柱)、萃取等步骤分别制备总黄酮和银杏内酯，但是总黄酮醇苷的纯度偏低，仅为50％左右；CN102552340A提供了一种制备银杏萜类单体及银杏总黄酮的制备方法，该法以银杏标准提取物EGB761为原料，经过溶解，过聚酰胺树脂纯化，冷藏，沉淀、萃取、重结晶等步骤制备银杏内酯(沉淀及重结晶步骤分别耗时1-10天、1-2天)，再通过使用阴离子交换树脂及机复合膜纳滤设备等制备总黄酮，整个工艺生产周期长，对设备要求较高，不适合工业化生产；CN1508542A提到了一种同时制备银杏內酯及总黄酮的方法，其中银杏內酯的制备需要经过萃取、重结晶、活性炭和硅胶进行层柱分离；总黄酮的制备需要经过两次上聚酰胺柱、一次硅胶柱，工艺操作复杂，产品转移率较低；CN102283870A是将银杏粗提物上ADS-F8树脂柱，分别用10％和70％乙醇进行洗脱，分别收集洗脱液，得银杏总黄酮和银杏內酯，银杏总黄酮经冷热处理得银杏总黄酮精制物，银杏内酯经乙酸乙酯萃取得银杏内酯精制物，但是产率较低(不足1％)；CN1847237A以银杏叶为原料，经提取、过大孔树脂柱截取不同洗脱液分别制备银杏內酯及总黄酮，但是两者纯度都不够，大概80％左右，该专利还给出了银杏内酯进一步精制的方法，涉及活性炭吸附、离心除杂、微滤膜精滤等，操作复杂，产品转移率较低；CN101596222A是银杏叶提取物通过过大孔树脂柱富集总黄酮醇苷及总內酯，然后再用乙酸乙水溶液萃取，水相经过葡糖糖凝胶制备总黄酮醇苷、乙酸乙酯相直接浓缩得银杏内酯，该法工艺步骤简单，但其产品转移率仍不太理想，有待进一步提高。

针对目前分离银杏叶总黄酮醇苷和银杏内酯的工艺中存在的问题，本发明提供了一种工艺简便易行，成本低，产物纯度高，无树脂残留，适用范围广的分离方法。