[发明专利]一种毛叶山桐子的组织培养育苗方法

说明书

技术领域

本公开涉及植物繁殖技术领域，尤其涉及一种毛叶山桐子的组织培养育苗方法。

背景技术

毛叶山桐子(Idesia polycarpa Maxim.var.vestita Diels)是大风子科山桐子属的变种，为我国的一个乡土树种。为落叶乔木，具有速生、水土保持功能好，且果实产量大、含油率高、油质好、可食用等特点，是一种较好的生态经济林木。

毛叶山桐子树高达10～15m，树皮平滑，叶互生，宽卵形至卵状心形，端尖，长8～20cm，宽6～20cm，边缘有疏锯齿，冠幅大，在自然生态中是中、低层植被的良好屏障。该树种属浅根性树种，主根不明显，但侧根非常发达，成水平分布，根系密集层为20～60cm，根端根须密集成网，这一特点使其对土地表层水土的保持能力极强。同时,毛叶山桐子产量高，单株产量高的可达200～300Kg，产果的持续时间长达70～100年。毛叶山桐子果实含油率高，干果达36％～38％，油品质量好，其中不饱和脂肪酸高达82％以上，亚油酸就高达68％以上，维生素E含量高达1‰以上，是良好的食用油、保健油和工业用油原料。

毛叶山桐子素有“绿荫护夏，红果迎秋”的美誉，可作为行道树和观赏树种，其成片种植区具有旅游开发价值。此外,毛叶山桐子具有耐旱、耐贫瘠的特点，对种植土壤要求不高。由于毛叶山桐子的上述突出优点，开发毛叶山桐子对生态建设、解决“三农”问题，促进农业和林业的可持续发展都有十分重要的意义。

我国四川、甘肃、陕西、安徽、浙江、江西、湖南、湖北、贵州等地都曾经有毛叶山桐子的分布，但由于种种原因，野生毛叶山桐子自然繁殖力十分低下，野生毛叶山桐子的数量已急剧减少。由于毛叶山桐子的种子极小，发芽困难，传统育苗方法导致育苗苗情参差不齐，苗子质量严重弱化，不利于产业化推广。毛叶山桐子也是一种雌雄异株的速生落叶乔木，传统种子育苗不能保证为雌性树种，导致油料树毛叶山桐子推广困难。

因而，亟需要一种毛叶山桐子的人工培育新方法，开展毛叶山桐子良种选育和组培快繁研究，利用现代生物技术手段，在建立组培再生和遗传转化的基础上，并使其大规模工程化应用。

发明内容

为克服相关技术中存在的问题，本公开实施例提供一种毛叶山桐子的组织培养育苗方法。

根据本公开实施例的第一方面，提供一种毛叶山桐子的组织培养育苗方法，包括：

步骤1：将培养基注入玻璃瓶中，经高温高压消毒待用；

步骤2：采用优良野生或驯化单株的腋芽茎段为外植体，经乙醇-纳米银溶液消毒，用无菌水冲洗4-5次；

步骤3：无菌条件下，将消毒的外植体接种在含有抗褐变成分的启动培养基中，将其置于8℃低温暗培养7天，然后转为温度23℃，日光为光源、光照强度为1500-20001x下，每日照光10小时，湿度为60％，培养30天，分化长成单芽苗；

步骤4：将长成的所述单芽苗，剪切成带有隐芽的小段，接种于注入增殖培养基的所述玻璃瓶中，进行增殖培养，不断增殖，得到试管芽苗；

步骤5：将培养的所述试管芽苗，对基部剪切去愈伤组织，接种于消毒的注入壮苗培养基的玻璃瓶中，进行壮苗培养30-35天；

步骤6：将试管壮苗，去掉基部愈伤组织和部分叶片，留3-5片叶片，接种于消毒的注入生根培养基的玻璃瓶中，进行生根培养10-15天；

步骤7：将生长的带有完整根的小苗，取出清洗，移栽到含有草炭和花生壳粉的基质中，浇透水，保持温度25-28℃，相对湿度80％以上，前10天遮光70％，后逐渐见光，20天后生根成活，35-45天后，全光照。

所述步骤1具体包括：

将培养基配好调节pH值，加热溶解后分装注入玻璃瓶中，经115℃高压消毒15min后凝固待用。

所述步骤2具体包括：

采用优良野生或驯化单株的腋芽茎段为外植体，经0.5％乙醇-纳米银溶液消毒15min，用无菌水冲洗4-5次放于无菌0.1％PVP水中保存待用。

所述步骤3具体包括：

无菌条件下，将消毒的外植体用手术刀斜切成带有隐芽的1cm-2cm长茎段。接种在步骤1的含有抗褐变成分的启动培养基中，将其置于8℃低温暗培养7天，然后转为温度23℃-25℃，日光为光源、光照强度为1500-20001x下，每日照光10小时，湿度为60％，培养30天，在茎段隐芽出分化长成单芽苗。

所述步骤7具体包括：