[发明专利]一种利用聚苯乙烯球的细胞周期散射光强模型建立方法

说明书

本发明提供了一种利用聚苯乙烯球的细胞周期散射光强模型建立方法，该方法利用不同粒径聚苯乙烯球的悬液建立得到用以作为对活体生物细胞周期进行散射光强检测参照标准的细胞周期散射光强模型，且聚苯乙烯球的性质稳定，也不会产生因细胞分裂生长而导致细胞周期不断变化，因此能够得以永久保存，解决了现有技术中永久保存的细胞周期散射光强检测参照标准难以制作的问题；并且，由于不同粒径聚苯乙烯微球稀释成不同梯度的浓度时，呈现出角度依赖光散射特性与细胞周期中不同时相的光散射特性相符合或经过修正后符合，因此采用本发明方法建立的细胞周期散射光强模型具有很好的普适性，为未来完善更多种类细胞周期光散射光强模型提供了可扩展的思路。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，尤其涉及细胞检测技术，具体涉及一种利用聚苯乙烯球的细胞周期散射光强模型建立方法。

背景技术

细胞周期是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，分为间期与分裂期两个阶段。其中，间期又分为三期、即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）与DNA合成后期（G2期）。分裂期（M期）分为前期、中期、后期和末期。

细胞周期理论不仅为肿瘤的研究提供重要的理论依据，而且细胞周期是肿瘤化疗的理论基础。精准的抗肿瘤药物可以直接针对不同周期的癌细胞进行灭杀，从而达到治疗的目的。因此，利用相关散射光强技术对不同周期的癌细胞进行分析测量对癌症的治疗诊断具有重要意义。

在利用散射光强技术对活体生物细胞周期进行检测时，其标准散射光强信息的建立至关重要。然而，由于活体生物细胞在培养器皿内难以永久的存活，并且生物细胞在存活期间也会不断分裂生长而导致细胞周期不断变化，因此很难利用生物细胞制作和保存每个固定细胞周期的散射光强检测参照标准。目前尚无其他有效的细胞周期散射光强模型建立方法。

发明内容

针对现有技术中存在的上述不足，本发明的目的在于提供一种利用聚苯乙烯球的细胞周期散射光强模型建立方法，其利用不同粒径聚苯乙烯球的悬液建立各个不同细胞周期的细胞周期散射光强模型，能够用以作为永久保存的对活体生物细胞周期进行散射光强检测的参照标准，解决现有技术中永久保存的细胞周期散射光强检测参照标准难以制作的问题。

为解决上述技术问题，本发明采用了如下的技术方案：

一种利用聚苯乙烯球的细胞周期散射光强模型建立方法，预先制作具有指定浓度的不同粒径聚苯乙烯球的悬液，利用广角光散射仪分别进行散射光强度测量，得到各不同粒径聚苯乙烯球的悬液各自对应的散射光强度分布曲线；然后采用各不同细胞周期的细胞样品分别制成具有同样指定浓度的对应各不同细胞周期的细胞悬液，在相同测量条件下利用广角光散射仪分别进行散射光强度测量，得到各个细胞周期的细胞悬液各自对应的散射光强度分布曲线，并与预先得到的各不同粒径聚苯乙烯球的悬液的散射光强度分布曲线进行对比，分别确定各个不同细胞周期的细胞悬液的散射光强度分布曲线各自所匹配的聚苯乙烯球悬液，从而将匹配得到的各粒径聚苯乙烯球的悬液作为细胞周期散射光强模型。

上述利用聚苯乙烯球的细胞周期散射光强模型建立方法中，具体而言，具体包括下述步骤：

1）预先制作具有指定浓度的不同粒径聚苯乙烯球的悬液并装入玻璃试管内，分别摇匀后，利用广角光散射仪分别测量每种粒径聚苯乙烯球的悬液在0~180°范围内每间隔5°上的散射光强度，根据测量结果，得到各不同粒径聚苯乙烯球的悬液各自对应的散射光强度分布曲线；

2）采用G1期、S期、G2期和M期的细胞样品，分别制成具有同样指定浓度的对应G1期、S期、G2期和M期的细胞悬液并装入玻璃试管内，分别摇匀后，在相同测量条件下，利用广角光散射仪分别测量每个细胞周期的细胞悬液在0~180°范围内每间隔5°上的散射光强度，根据测量结果，得到G1期、S期、G2期和M期的细胞悬液各自对应的散射光强度分布曲线；