[发明专利]一种利用豆制品加工副产物豆渣提高克氏梭菌发酵生产己酸产量的方法

说明书

本发明公开了一种添加豆制品加工副产物豆渣提高克氏梭菌(Clostridium kluyveri)发酵生产己酸产量的方法，包括如下步骤：(1)豆渣毛霉培养物的制备，将毛霉菌株接入豆渣培养基三角瓶中静止培养，再将获得的培养物烘干，研磨成粉末，得到豆渣毛霉培养物；(2)克氏梭菌种子培养；(3)己酸发酵培养，将克氏梭菌种子液接入己酸发酵培养基中，在发酵培养过程中添加豆渣毛霉培养物。此法可明显提高克氏梭菌己酸产量，具有操作简单，降低生产成本，减少污染处理等优势，易于工业化应用。

技术领域

本发明涉及以克氏梭菌发酵生产己酸的工艺方法，特别是一种利用豆渣的毛霉培养物来提高己酸产量的生产方法。

背景技术

己酸是含有六个碳原子的中链脂肪酸，它主要是由克氏梭菌(Clostridium kluyveri)发酵产生。己酸是浓香型白酒中最重要的有机酸，有增强浓香型白酒的后味绵甜感作用，己酸与浓香型白酒泥窖发酵糟醅产生的乙醇，通过酯化反应，生成浓香型大曲酒的主体香味成分己酸乙酯，从而改善浓香型白酒的风味及口感。因此，己酸含量的高低间接影响成品酒的质量，一般己酸含量高，酒中己酸乙酯的含量也高，反之，含量就低。因此，如何提高浓香型白酒发酵糟醅的己酸浓度，进而提高己酸乙酯的浓度，成为发酵浓香型白酒生产企业的主要课题。

目前，国内外己酸的发酵水平不一，所采用的方法也是多种多样，主要采用培养基条件优化和调整发酵工艺等手段提高其产量，但是采用添加另外一种食品加工副产物的微生物培养产物来提高己酸产量的报道并不多见；尤其尚未发现有公布使用豆制品加工副产物豆渣的毛霉培养物来提高己酸产量的报道，此方法既能提高目标产物的产量，又能实现废物再利用，节约能源，有利于环境保护。

发明内容

本发明目的就是提供一种利用豆制品加工副产物豆渣提高克氏梭菌发酵生产己酸产量的方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

(1)豆渣毛霉培养物的制备

称取20g新鲜豆渣转入500mL三角瓶中，121℃灭菌15-20min后，接入毛霉菌株Actinomucor elegans CICC 3118，于15-23℃条件下培养3-7d。再将获得的培养物放入100℃-150℃的烘箱中干燥，研磨成粉末，得到豆渣毛霉培养物；

(2)克氏梭菌种子培养

从克氏梭菌液体保藏菌种中吸取1mL接入盛有9 mL种子培养基的试管中，33-37℃下培养5-8d后，转入装有90mL种子培养基的100mL三角瓶中，33-37℃下培养5-8d后制得克氏梭菌种子液，作为己酸发酵试验备用；

种子培养基由下述成分组成：醋酸钠1-10g/L，K₂HPO₄ 0.1-10g/L，MgSO₄•7H₂O0.1-10g/L，(NH₄)₂SO₄ 0.1-10g/L，酵母膏0.1-20g/L，CaCO₃ 0.1-10g/L，乙醇5-50mL/L，0.1MPa、121℃灭菌30min，接种前加入乙醇。

(3)己酸发酵培养

将所述克氏梭菌种子液按5-10%的接种量接入己酸发酵培养基中，33-37℃条件下静置培养7-20d，在发酵0-8d一次性添加10-40g/L豆渣毛霉培养物，发酵结束后获得己酸发酵液；