[发明专利]蓝舌病病毒型特异性竞争ELISA检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.蓝舌病病毒型特异性竞争ELISA检测试剂盒，其特征在于包括以下两组组分：

组分I中包括包被蓝舌病病毒抗原I的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体I，所述的单克隆抗体I由杂交瘤细胞株8B3G11分泌产生，所述的杂交瘤细胞株8B3G11保藏在中国典型培养物保藏中心，地址在武汉大学，其微生物保藏号为：CCTCCNo.C201770；所述的蓝舌病病毒抗原I为蓝舌病病毒8型VP2蛋白或是含有SEQ ID NO.1所示抗原表位的VP2蛋白的片段；

组分II中包括包被蓝舌病病毒抗原II的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体II，所述的单克隆抗体II由杂交瘤细胞株8B5D4分泌产生，所述的杂交瘤细胞株8B5D4保藏在中国典型培养物保藏中心，地址在武汉大学，其微生物保藏号为：CCTCCNo.C201769；所述的蓝舌病病毒抗原II为蓝舌病病毒8型VP2蛋白或是含有SEQ ID NO.2所示抗原表位的VP2蛋白的片段。

2.如权利要求1所述的竞争ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括抗鼠的酶标二抗、阴性对照、阳性对照、稀释液、TMB显色液、洗涤液和终止液。

3.如权利要求2所述的竞争ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述的抗鼠的酶标二抗为HRP标记的山羊抗鼠IgG。

4.如权利要求2所述的竞争ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述阴性对照为蓝舌病病毒阴性血清；所述阳性对照为蓝舌病病毒8型阳性血清；所述稀释液为含有5w/v％脱脂乳的PBS缓冲液；所述洗涤液为PBS缓冲液。

5.如权利要求4所述的竞争ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述的PBS缓冲液中包括NaCl 8g，KCl 0.2g，Na₂HPO₄ 1.44g，KH₂PO₄ 0.24g，溶解后pH值调为7.4，用去离子水定容至1000mL。

6.如权利要求1所述的竞争ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述的含有SEQ ID NO.1所示抗原表位的VP2蛋白的片段由Genbank登录号为195972621的8型BTV的L2基因的1021-2091bp的核苷酸序列编码；所述的含有SEQ ID NO.2所示抗原表位的VP2蛋白的片段由Genbank登录号为195972621的8型BTV的L2基因的1021-2091bp的核苷酸序列编码。

7.如权利要求1所述的竞争ELISA检测试剂盒，其特征在于，用于蓝舌病病毒型特异性检测时，分别采用组分I和组分II进行竞争ELISA检测，根据检测结果进行判断：如果两种方法检测结果均为阴性，则待检样品为BTV-2、BTV-3、BTV-5、BTV-9、BTV-11、BTV-12、BTV-13、BTV-15、BTV-16、BTV-17、BTV-20或BTV-24感染的血清或阴性血清；如果两种方法检测结果均为阳性，则待检样品为BTV-7或BTV-8感染的血清；如果采用组分I进行竞争ELISA检测的结果为阳性而采用组分II进行竞争ELISA检测的结果为阴性，则待检样品为BTV-10感染的血清；如果采用组分I进行竞争ELISA检测的结果为阴性而采用组分II进行竞争ELISA检测的结果为阳性，待检样品为BTV-1、BTV-4、BTV-6、BTV-14、BTV-18、BTV-19、BTV-21或BTV-23感染的血清。