[发明专利]一种工程化心肌组织中心肌细胞去分化重塑的方法在审

专利信息
申请号: 201710419430.0 申请日: 2017-06-06
公开(公告)号: CN107164317A 公开(公告)日: 2017-09-15
发明(设计)人: 王常勇;周瑾;刘伟;沈远;马金旭 申请(专利权)人: 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
主分类号: C12N5/077 分类号: C12N5/077
代理公司: 北京中誉威圣知识产权代理有限公司11279 代理人: 叶立涛,田昕
地址: 100850*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 工程 心肌 组织 细胞 分化 重塑 方法
【权利要求书】:

1.一种工程化心肌组织中心肌细胞去分化重塑的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)取哺乳动物肌腱,剪碎,溶于醋酸溶液中,12000rpm/4℃离心后取上清,制成Ⅰ型胶原;

(2)将Ⅰ型胶原,基质胶matrigel,DMEM溶液混合,并用NaOH溶液调为中性,制成混合物;

(3)取哺乳动物的心肌细胞,与步骤(2)制备的混合物混合,接种到孔板中,在的培养箱中预培养0.5-1h后,添加培养基,培养至心肌重塑形成。

2.根据权利要求1所述的工程化心肌组织中心肌细胞去分化重塑的方法,其特征在于,所述醋酸溶液的质量分数为1%;所述Ⅰ型胶原的浓度为2mg/ml。

3.根据权利要求1所述的工程化心肌组织中心肌细胞去分化重塑的方法,其特征在于,所述Ⅰ型胶原,基质胶,DMEM的质量比为5:4:1;所述DMEM溶液的质量浓度为0.1-10%。

4.根据权利要求1所述的工程化心肌组织中心肌细胞去分化重塑的方法,其特征在于,所述NaOH溶液的浓度为0.1M。

5.根据权利要求1所述的工程化心肌组织中心肌细胞去分化重塑的方法,其特征在于,所述哺乳动物的心肌细胞的细胞密度为2-9×106cells/ml。

6.根据权利要求1所述的工程化心肌组织中心肌细胞去分化重塑的方法,其特征在于,所述孔板为12孔板,接种量为每孔1ml。

7.根据权利要求1所述的工程化心肌组织中心肌细胞去分化重塑的方法,其特征在于,所述培养箱的培养条件为37uC/5%CO2

8.根据权利要求1所述的工程化心肌组织中心肌细胞去分化重塑的方法,其特征在于,所述培养基的成分包括85wt%高糖DMEM和15wt%FBS。

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