[发明专利]聚酰胺‑胺树状大分子与纳米金颗粒的复合物作为非病毒载体进行基因转染的应用方法在审
| 申请号： | 201710422901.3 | 申请日： | 2017-06-07 |
| 公开（公告）号： | CN107142281A | 公开（公告）日： | 2017-09-08 |
| 发明（设计）人： | 曹雪雁;史向阳;徐琲;李爱军;郝欣欣 | 申请（专利权）人： | 东华大学 |
| 主分类号： | C12N15/87 | 分类号： | C12N15/87;C08G73/02 |
| 代理公司： | 上海申汇专利代理有限公司31001 | 代理人： | 翁若莹,王文颖 |
| 地址： | 200050 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 聚酰胺 树状 大分子 纳米 颗粒 复合物 作为 病毒 载体 进行 基因 转染 应用 方法 | ||
1.一种聚酰胺-胺树状大分子与纳米金颗粒的复合物作为非病毒载体进行基因转染的应用方法，其特征在于，所述树状大分子的表面是氨基末端，对其进行化学修饰可降低其毒性并提高转染效率；其末端连接靶向基团包括叶酸，RGD，透明质酸，能高效地进行基因传递。
2.如权利要求1所述的聚酰胺-胺树状大分子与纳米金颗粒的复合物作为非病毒载体进行基因转染的应用方法，其特征在于，所述化学修饰的方法为修饰聚乙二醇、修饰环糊精、乙酰化和烷基化的方法中的任意一种或几种。
3.如权利要求1所述的聚酰胺-胺树状大分子与纳米金颗粒的复合物作为非病毒载体进行基因转染的应用方法，其特征在于，所述复合物中Au与G5.NH2摩尔比为25∶1及以上。
4.如权利要求3所述的聚酰胺-胺树状大分子与纳米金颗粒的复合物作为非病毒载体进行基因转染的应用方法，其特征在于，所述复合物中Au与G5.NH2摩尔比为25∶1、50∶1、75∶1或100∶1。
5.如权利要求1所述的聚酰胺-胺树状大分子与纳米金颗粒的复合物作为非病毒载体进行基因转染的应用方法，其特征在于，所述复合物在基因转染体系中的浓度为1.0～2.0mg/mL。
6.如权利要求1-5任意一项所述的聚酰胺-胺树状大分子与纳米金颗粒的复合物作为非病毒载体进行基因转染的应用方法，其特征在于，所述基因传递的传递外源治疗基因包括pDNA，CpG DNA，反义核苷酸，siRNA及ssDNA中的任意一种或几种。
7.如权利要求6所述的聚酰胺-胺树状大分子与纳米金颗粒的复合物作为非病毒载体进行基因转染的应用方法，其特征在于，所述外源治疗基因的目标细胞包括癌细胞及体细胞。
8.如权利要求7所述的聚酰胺-胺树状大分子与纳米金颗粒的复合物作为非病毒载体进行基因转染的应用方法，其特征在于，所述癌细胞包括HeLa，U87及A549；所述体细胞包括巨噬细胞，T淋巴细胞，B淋巴细胞，树突状细胞。
9.如权利要求6所述的聚酰胺-胺树状大分子与纳米金颗粒的复合物作为非病毒载体进行基因转染的应用方法，其特征在于，所述复合物与DNA的N/P比为0.5∶1及以上。
10.如权利要求9所述的聚酰胺-胺树状大分子与纳米金颗粒的复合物作为非病毒载体进行基因转染的应用方法，其特征在于，所述复合物与DNA的N/P比为0.5∶1、1∶1、2.5∶1、5∶1或7∶1。
11.如权利要求6所述的聚酰胺-胺树状大分子与纳米金颗粒的复合物作为非病毒载体进行基因转染的应用方法，其特征在于，所述pDNA是从大肠杆菌中提取的，质粒为携带卡那霉素抗性基因并带有绿色荧光蛋白报告基因的质粒；所述CpG DNA是由人工合成，序列为5’-TCCATGACGTTCCTGATGCT-3’。
12.如权利要求1所述的聚酰胺-胺树状大分子与纳米金颗粒的复合物作为非病毒载体进行基因转染的应用方法，其特征在于，所述基因转染的转染时间为4～12h。
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