[发明专利]酵母菌DD12-7菌株及其应用

说明书

本发明公开了一种酵母菌，为拟威尔酵母(Williopsis sp.)DD12‑7菌株，其保藏号为CGMCC No.9833，具有分泌抗白色假丝酵母的嗜杀因子能力。本发明还公开了所述酵母菌的应用。本发明所述酵母菌株DD12‑7具有营养要求简单，发酵周期短的特点，应用该菌株生产抗白色假丝酵母的嗜杀因子具有很高的成本优势和良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及酵母菌DD12-7菌株及其应用。

背景技术

1963年，Bevan和Makower首次在保存的酿酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae）中发现酵母菌株间存在着相互杀死的现象，进而发现一种具有嗜杀活性的酵母菌，它分泌的外毒素能抑制或杀死野生酵母菌。嗜杀酵母分泌的嗜杀毒素称为嗜杀因子，能够杀死敏感酵母菌株，但对嗜杀酵母本身却没有嗜杀作用，也就是说具有免疫性。从已纯化和表征的嗜杀毒素来看，嗜杀酵母所产的嗜杀毒素多为蛋白质或糖蛋白，在生物学特性上不耐热、对蛋白酶敏感。嗜杀酵母分泌的嗜杀因子可作为抑制某些病原酵母及类酵母的抗真菌药制剂。

白色假丝酵母又称白色念珠菌（Candida albicans），是一种真菌，通常存在于正常人口腔，上呼吸道，肠道及阴道，一般在正常机体中数量少，不引起疾病，当机体免疫功能或一般防御力下降或正常菌群相互制约作用失调，则本菌大量繁殖并改变生长形式（芽生菌丝相）侵入细胞引起疾病。

发明内容

本发明的目的之一是提供酵母菌DD12-7菌株。

本发明目的之二涉及上述酵母菌株的应用。具体地，涉及应用该酵母菌株生产抗白色假丝酵母（Candida albicans）的嗜杀因子的方法。

本发明提供酵母菌株，为拟威尔酵母(Williopsissp.)DD12-7，其保藏号为CGMCCNo.9833，具有分泌抗白色假丝酵母的嗜杀因子能力。该酵母菌来源于海洋，分离纯化自辽宁丹东鸭绿江入海口沉积物。

应用上述酵母菌株生产抗白色假丝酵母（Candida albicans）的嗜杀因子的方法，在培养基中培养Williopsissp.DD12-7使细菌分泌抗白色假丝酵母嗜杀因子，以在细菌和培养基中聚集了抗白色假丝酵母嗜杀因子后，从培养基和细菌内回收并提纯。

所述培养基为YPD培养基，其中包含葡萄糖1.5~3%、蛋白胨1.5~3%和酵母粉0.5~2%。所述培养为振荡培养，在20~30℃和pH 4.5~5.0下进行，转速100~150rpm，发酵时间60~80h。

本发明的优点是：从海洋环境中分离出产嗜杀因子的Williopsissp.DD12-7菌株，其所产嗜杀因子能够杀灭致病菌白色假丝酵母。该菌株DD12-7具有营养要求简单，发酵周期短的特点，因此用该菌株生产抗白色假丝酵母的嗜杀因子具有很高的成本优势和良好的应用前景。

本发明所述酵母菌在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为：CGMCC No.9833，保藏日期为：2014年10月19日，分类命名为：拟威尔酵母Williopsissp.。

附图说明

图1 嗜杀酵母初筛结果。

图2 嗜杀因子粗提液复筛结果。

图3 纯化嗜杀因子对敏感菌的作用。

具体实施方式

以下结合具体的实施例对本发明作进一步的说明，其中以下采用的原料或者试剂，如无特殊指明均为市售。