[发明专利]氨基甲酸酯和菊酯类多残留检测抗原、抗体及其制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种氨基甲酸酯和菊酯类多残留检测抗原、抗体的制备方法及应用。本发明填补了本领域长期以来的技术空白，提供了一种同时检测氨基甲酸酯类和菊酯类多残留的联合抗原，基于所述联合抗原，有效建立一种同时检测氨基甲酸酯类和菊酯类多残留的检测方法。具有广阔的应用前景。所述氨基甲酸酯和菊酯类多残留检测抗原，其结构式如式（Ⅰ）所示：（Ⅰ）。

技术领域

本发明涉及食品安全技术领域，更具体地，涉及一种氨基甲酸酯和菊酯类多残留检测抗原、抗体及其制备方法及应用。

背景技术

我国是一个农业大国，每年农产品的产量和消耗量均居于世界前列，然而农药残留问题一直困扰着我国农业发展。氨基甲酸酯类农药和菊酯类农药是我国农业生产中常见的两类农药，为此研究人员针对这两类农药开发了一系列的检测方法，其中免疫检测法由于具有灵敏度高、特异性强、前处理简单、检验周期短、适用于大批量样品检测等优点，已成为近年来研究的热点。然而受特异性的思维定势的限制，现有的免疫分析方法只适用于其中一类农药的检测，而无法同时满足对多种农药的检测，造成了无用的重复劳动和资源的浪费。因此开发一种能够同时检测氨基甲酸酯类农药和菊酯类农药的同时快速检测方法具有重要的意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有氨基甲酸酯类农药和菊酯类农药残留同时检测分析的技术空白，提供一种同时检测氨基甲酸酯类农药和菊酯类农药残留用的抗原。

本发明还一要解决的技术问题是同时检测氨基甲酸酯类农药和菊酯类农药残留用的半抗原和抗原的制备方法。

本发明要解决的另一技术问题是提供同时检测氨基甲酸酯类农药和菊酯类农药残留用的抗体。

本发明还一要解决的技术问题是同时检测氨基甲酸酯类农药和菊酯类农药残留用的抗原和抗体的应用。

本发明的目的通过以下技术方案予以实现：

提供一种氨基甲酸酯类和菊酯类联合抗原，其结构式如式(Ⅰ)所示：

优选地，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、人血清白蛋白、血蓝蛋白或卵清蛋白。

本发明同时提供所述氨基甲酸酯类和菊酯类多残留抗原的制备方法，是采用活泼酯法将氨基甲酸酯类半抗原与载体蛋白偶联，然后将偶联后的产物继续通过活泼酯法与菊酯类半抗原进行偶联，制备获得氨基甲酸酯类和菊酯类多残留检测抗原。

具体地，所述氨基甲酸酯类和菊酯类联合抗原的制备方法，包括以下步骤：

S1.将氨基甲酸酯类半抗原溶于DMF，形成混合溶液，然后加入EDC和NHS，于室温下搅拌反应；待反应结束后，将上述反应液加入到载体蛋白的磷酸盐(pH7.4)缓冲溶液中，继续反应，然后将反应液于室温下透析，制得氨基甲酸酯类完全抗原；

S2.将菊酯类半抗原溶于DMF中，形成混合溶液，然后加入EDC和NHS，于室温下搅拌反应；

S3.将步骤S1制得的氨基甲酸酯类完全抗原溶于DMF溶液中，然后加入步骤S2制备的反应液，于室温下反应，待反应结束后，将将反应液进行透析，即得到所述氨基甲酸酯类和菊酯类多残留检测抗原。

优选地，步骤S1所述氨基甲酸酯类半抗原与载体蛋白的质量比为12:1。

优选地，步骤S1所述氨基甲酸酯类半抗原与EDC和NHS的反应时间为8～24h。

优选地，步骤S1所述氨基甲酸酯类半抗原与载体蛋白的反应时间为6～24h。

优选地，步骤S2所述反应时间为8～12h。

优选地，步骤S3所述菊酯类半抗原与氨基甲酸酯类抗原的质量比为10:1。

优选地，步骤S3所述反应时间为6～8h。