[发明专利]一种β-甘露聚糖酶工程菌的筛选方法

权利要求书

1.一种β-甘露聚糖酶工程菌的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将β-甘露聚糖酶的表达菌在含有台酚蓝的KT平板上培养，直至平板上产生水解圈；所述的培养包括三个阶段：第一阶段为37±2℃ 保温6-12 h；第二阶段为25±2℃ 保温1-3h；第三阶段为37^oC~50℃ 保温8-20 h；

（2）测量水解圈直径与微生物菌落直径，以二者大小的比值作为β-甘露聚糖酶的酶活指数，该指数与酶活正相关；

所述β-甘露聚糖酶表达菌，其宿主菌为E. coli BL21(DE3)或E. coli BL21。

2.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，所述第一阶段为37 ℃ 保温10 h。

3.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，所述第二阶段为25℃ 保温2 h。

4.根据权利要求3所述的筛选方法，其特征在于，所述第三阶段的保温时间为12 h。

5.根据权利要求1~4任意一项所述的筛选方法，其特征在于，所述KT平板的原料组分为：1-2%蛋白胨、0.5-1%酵母提取物、1%氯化钠、1-3%琼脂和0.3-1%魔芋胶溶液。

6.根据权利要求5所述的筛选方法，其特征在于，所述KT平板的配制：将上述原料混合后115℃ 条件下高压灭菌20 min，冷却后加入预先配制好的1%台酚蓝溶液至终浓度为0.02-0.05%。

7.根据权利要求5所述的筛选方法，其特征在于，所述β-甘露聚糖酶表达菌，其表达载体为pET30(a)。