[发明专利]一种基于第二代聚酰胺‑胺树状大分子的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备方法

权利要求书

1.一种基于第二代聚酰胺-胺树状大分子的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备方法，包括：

(1)将第二代聚酰胺-胺树状大分子G2.NH₂和放射性核素^99mTc螯合剂NOTA分别溶于二甲基亚砜DMSO中，混合均匀后，于室温下持续搅拌反应24～28小时，透析，冷冻干燥后得到螯合剂NOTA修饰的第二代聚酰胺-胺树状大分子，即G2-NOTA；

(2)将一端为羧基另一端为马来酰亚胺基团的聚乙二醇分子COOH-PEG-MAL和多肽RGD分别溶于二甲基亚砜DMSO中，混合均匀后，搅拌反应24～28小时，透析，冷冻干燥后得到多肽RGD修饰的聚乙二醇分子，即RGD-PEG-COOH；

(3)将RGD-PEG-COOH溶于DMSO中，首先加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐EDC活化，然后加入N-羟基琥珀酰亚胺NHS继续活化，接着将活化后的聚乙二醇溶液逐滴加入到G2-NOTA的DMSO溶液中，于室温条件下搅拌反应72～76小时，最后透析，冷冻干燥后得到RGD修饰的第二代聚酰胺-胺树状大分子，即G2-NOTA-PEG-RGD；

(4)将上述G2-NOTA-PEG-RGD溶解在水中，加入氯金酸水溶液，在室温条件下搅拌30～60分钟，然后加入预冷的硼氢化钠水溶液，于冰水中搅拌反应3～5小时后，透析，冷冻干燥后得到RGD修饰且包裹了金纳米颗粒的第二代聚酰胺-胺树状大分子，即G2-NOTA-PEG-RGD@Au；

(5)将上述G2-NOTA-PEG-RGD@Au溶解在放射性高锝酸盐溶液中，得到RGD修饰且包裹金纳米颗粒和螯合了放射性核素^99mTc的SPECT/CT双模态成像造影剂，即G2-NOTA(^99mTc)-PEG-RGD@Au。

2.根据权利要求1所述的一种基于第二代聚酰胺-胺树状大分子的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的G2.NH₂和NOTA的摩尔比为1:4。

3.根据权利要求1所述的一种基于第二代聚酰胺-胺树状大分子的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中的COOH-PEG-MAL和RGD的摩尔比为1:1.2。

4.根据权利要求1所述的一种基于第二代聚酰胺-胺树状大分子的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中的RGD-PEG-COOH溶于DMSO后的浓度为6mg/mL；G2-NOTA的DMSO溶液的浓度为4.5mg/mL。

5.根据权利要求1所述的一种基于第二代聚酰胺-胺树状大分子的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中的RGD-PEG-COOH、EDC、NHS与G2-NOTA的摩尔比为10:50:50:1。

6.根据权利要求1所述的一种基于第二代聚酰胺-胺树状大分子的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中的硼氢化钠、氯金酸和G2-NOTA-PEG-RGD的摩尔比为30:6:1。

7.根据权利要求1所述的一种基于第二代聚酰胺-胺树状大分子的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中的G2-NOTA-PEG-RGD@Au的质量和放射性高锝酸盐溶液的放射量的比例为28mg:35-78MBq。

8.根据权利要求1所述的一种基于第二代聚酰胺-胺树状大分子的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)～(4)中的透析具体为：用截留分子量为1000～3000的透析袋透析3天，每次透析所用蒸馏水2L，共换水9次。