[发明专利]一种基于第二代聚酰胺‑胺树状大分子的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于造影剂领域，特别涉及一种基于第二代聚酰胺-胺树状大分子的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备方法。

背景技术

核医学影像中SPECT或PET显像设备能接收放射性核素发出的射线，能清晰地观察到造影剂参与生物体内各种生理生化及代谢方面的功能信号，获得定性、定量及定位的临床疾病诊治结果。这种显像方式与传统的形态学成像方法(CT、B超、MRI)相比，可以反映脏器或组织的血流变化、受体密度及活性改变、代谢及功能变化，成为临床诊治疾病的最先进技术之一。同时，核医学成像也存在空间分辨率低和不能明确定位影像解剖学位置的缺点。PET/CT及SPECT/CT双模态成像技术能同时获得体内SPECT的功能代谢信息和CT的解剖诊断信息的图像融合与诊断效能倍增(Delbeke et al.,J.Nucl.Med.2006,47(7),1227-1234)。因此，与单独的SPECT或CT相比，SPECT/CT在诊断疾病以及评价预后等方面都更加具有临床应用意义。

虽然SPECT/CT双模态影像设备已经在临床上有了极大的推广，但是相应的SPECT/CT双模态成像造影剂的研制开发还没有得到足够的重视。虽然CT和SPECT两种成像造影剂的使用可以完成相应的造影成像，但会给临床操作造成不便，也会增加造影剂对患者的毒副作用，同时还存在造影剂之间难以协调，体内分别存在差异的现象。因此，开发一种多功能的造影剂体系适用于SPECT/CT双模态成像造影诊断，将会极大地提高诊断的灵敏度与准确度，并对患者造成较小的痛苦和毒副作用，在临床中将具有极大应用价值。

低代数的树状大分子因其代数低而具有开放式的结构以及表面基团较少等特点。Liu等(Liu et al.,Chem.-Eur.J.2013,19,6409-6416)用第二代聚酰胺-胺树状大分子作为稳定剂制备金纳米颗粒(＞5nm)并修饰叶酸靶向剂，实现对肿瘤组织的CT成像识别。Cao等(Cao etal.,J.Mater.Chem.B,2015,3,286-295)制备了第二代聚酰胺-胺树状大分子包裹金纳米颗粒具有乳糖酸靶向肝癌功能的CT纳米造影剂，具有很好的特异性靶向功能和良好的CT成像效果。史向阳等(史向阳，温诗辉，赵晋华，赵凌舟.功能化的基于树状大分子的SPECT-CT双模态成像造影剂及其制备方法：中国，201410271238.8[P].2014.06.18)用第五代树状大分子包裹金纳米颗粒并标记^99mTc，实现了小鼠体内不同组织部位的SPECT/CT成像，且成像效果良好。

检索国内外有关SPECT/CT双模态造影剂方面的文献和专利结果表明：目前，还没有发现修饰了螯合剂NOTA和多肽RGD的第二代聚酰胺-胺树状大分子包裹了金纳米颗粒并螯合了放射性核素^99mTc的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备与应用方面的报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种基于第二代聚酰胺-胺树状大分子的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备方法，该造影剂制备工艺简单，反应条件温和，易于操作分离，所用均为环境友好材料，具有实施商业化的前景。

本发明的一种基于第二代聚酰胺-胺树状大分子的SPECT/CT双模态成像造影剂的制备方法，包括：

(1)将第二代聚酰胺-胺树状大分子G2.NH₂和放射性核素^99mTc螯合剂NOTA分别溶于二甲基亚砜DMSO中，混合均匀后，于室温下持续搅拌反应24～28小时，透析，冷冻干燥后得到螯合剂NOTA修饰的第二代聚酰胺-胺树状大分子，即G2-NOTA；

(2)将一端为羧基另一端为马来酰亚胺基团的聚乙二醇分子COOH-PEG-MAL和多肽RGD分别溶于二甲基亚砜DMSO中，混合均匀后，搅拌反应24～28小时，透析，冷冻干燥后得到多肽RGD修饰的聚乙二醇分子，即RGD-PEG-COOH；

(3)将RGD-PEG-COOH溶于DMSO中，首先加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐EDC活化，然后加入N-羟基琥珀酰亚胺NHS继续活化，接着将活化后的聚乙二醇溶液逐滴加入到G2-NOTA的DMSO溶液中，于室温条件下搅拌反应72～76小时，最后透析，冷冻干燥后得到RGD修饰的第二代聚酰胺-胺树状大分子，即G2-NOTA-PEG-RGD；