[发明专利]一种高效杀线虫的组合菌剂的制备方法

权利要求书

1.一种高效杀线虫的组合菌剂的制备方法，其特征在于，包括：

步骤(1)，制备金龟子绿僵菌悬液；将金龟子绿僵菌菌种于24℃接种在PDA斜面培养基上培养5-10天，该PDA斜面培养基的配方包括，以重量份数计，土豆粉5-10份、蔗糖1-5份、玉米粉5-20份、MgSO₄·7H₂O 0.1-5份、以及K₂HPO₄ 0.2-3份，培养结束后使用去离子水洗涤，洗下液体即金龟子绿僵菌悬液；

制备光合细菌嗜酸柏拉红菌PSB-1悬液；将光合细菌嗜酸柏拉红菌PSB-1菌种置于液体培养基中培养发酵，在1000-4000LX灯光照射培养5-7天，或者在自然光下光照培养15-30天；其中，该液体培养基包括，以重量份数计，蔗糖5-10份、乙酸钾0.1-2份、MgSO₄·7H₂O 0.01-0.2份、KH₂PO₄ 0.02-0.2份、CaCl₂·2H₂O 0.01-0.3份、以及CaCO₃ 0.02-0.3份，该液体培养基的pH为6.4-6.8；液体培养所得溶液即光合细菌嗜酸柏拉红菌PSB-1悬液；

制备克鲁丝假丝酵母菌TY9悬液；将克鲁丝假丝酵母菌TY9接种至液体培养基中培养5-10天，培养温度是25-33℃，该液体培养基包括，以重量份数计，蔗糖10-20份、蛋白胨5-10份、以及氯化钠1-3份，液体培养所得溶液即克鲁丝假丝酵母菌TY9悬液；

步骤(2)，将步骤(1)获得的金龟子绿僵菌悬液、光合细菌嗜酸柏拉红菌PSB-1悬液、克鲁丝假丝酵母菌TY9悬液按照质量比1∶2∶2.5的比例混合，在混合液中加入占混合夜总重量的5-8％的蔗糖和1-10％土豆粉，获得混合菌液，在1-5℃下保存备用；

步骤(3)，将浒苔粉碎，直径在1-10cm，自然晾晒后备用，得到干燥浒苔；

步骤(4)，将步骤(2)的混合菌液、步骤(3)的干燥浒苔混合，同时加入干燥浒苔重量0.1-0.6％的蔗糖、0.01-0.5％的尿素以及0.001-0.01％的Na₂B₄O₇·10H₂O，进行自然发酵，发酵10-20天，自然凉干即得所述的一种长效生物杀线虫组合剂。

2.根据权利要求1所述的一种高效杀线虫的组合菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，混合菌液与的干燥浒苔的质量用量比例为1-3∶100-2000。

3.根据权利要求1所述的一种高效杀线虫的组合菌剂的制备方法，其特征在于，所得长效生物杀线虫组合剂中，金龟子绿僵菌种含量为菌种含量为3×10⁶cfu·g^-1以上、光合细菌嗜酸柏拉红菌菌种含量为2×10⁷cfu·g^-1以上、克鲁丝假丝酵母菌菌种含量为1×10⁷cfu·g^-1以上。

4.一种由权利要求1-3任意一项所述制备方法制备得到的高效杀线虫的组合菌剂。