[发明专利]测定孕妇IgG抗-A和抗-B血型抗体或人血型反定型的免疫层析试纸条

说明书

本发明涉及一种测定孕妇IgG抗‑A和抗‑B血型抗体或人血型反定型的免疫层析试纸条，属于生物医药技术领域。其包括样品垫、示踪垫、纤维素膜、IgM阻滞区、IgG检测区、质控区、吸水垫和支撑板；所述支撑板位于底部，支撑板上设置有纤维素膜，纤维素膜两端分别搭接示踪垫和吸水垫；所述示踪垫另一端搭接样品垫。本发明可简易快速特异性测定人血液IgG类抗‑A和抗‑B抗体的有无及效价，取代传统的且现行的“IgM灭活+抗人球试验+观察凝集”的测定方式，极大地简化了操作步骤，缩短了耗时；亦可用于测定人血型的反定型。

技术领域

本发明涉及一种测定孕妇IgG抗-A和抗-B血型抗体或人血型反定型的免疫层析试纸条，可用于测定孕妇产前IgG抗-A和抗-B抗体及效价的测定，预测新生儿溶血病；也可用于鉴定个体血型的反定型，属于生物医药技术领域。

背景技术

众多发明专利采用免疫层析试纸条技术建立特定的检测方法，它们的技术基本相同，不同的是，或检测对象不同，或检测目的不同。

数个发明专利或实用新型专利，包括被驳回或未授权的专利申请资料，均阐述采用免疫层析试纸条技术测定人血型的反定型，但这些专利申报至今并无相应的产品出现，原因是实践和理论上都存在技术缺陷或障碍，这些专利陈述用于检测血型抗体的抗原，为红细胞或红细胞膜提取物或红细胞溶血溶液等，事实上，其一，这些物质很难稳定、均匀地固定在纤维素膜上，其二，也是最关键的一点，红细胞血型抗原有200多种，采用免疫层析检测时根本无法保证特异性检测抗-A和抗-B来鉴定ABO血型的反定型。

目前反定型常用的凝集法之所以可以检测抗-A和抗-B抗体，是因为一般人血液中只有抗-A和抗-B抗体能在盐水中凝集红细胞，但当采用免疫层析法检测时，样本中的任何抗体都可以与固定在膜上的或示踪物上的红细胞物质上的相应抗原结合。

因此过往专利阐述的人血型反定型方法，并不能制备出免疫层析试纸条产品用于检测ABO血型抗体，特别是无法保证准确率。

即便是新近有申请陈述使用人工合成的血型A抗原和B抗原，同样在理论上和实践中都是行不通的，因为A抗原和B抗原的化学本质为多糖，其无法包被在纤维素膜上，也不能直接偶联蛋白或多肽。

孕妇产前血清免疫性即IgG抗-A、抗-B抗体及效价的测定是预测ABO血型新生儿溶血病的产前常规检测项目，观察效价的变化，可为下一步医疗行为和决策提供依据。目前世界范围内包括我国，产前IgG抗-A、抗-B抗体的测定，均是采用抗人球蛋白试验测定法，基本流程为：先将被检样本血清或血浆与一定量的二巯基乙醇(2-ME)或二硫苏糖醇(DTT)等在37℃孵育1～2小时左右并不时摇动以灭活IgM抗体，然后取出混合物倍比稀释，接着将每管稀释液分别与制备好的3～5％的A型和B型红细胞在37℃孵育0.5～1小时使IgG抗-B或抗-A与红细胞结合，取出每个反应管用生理盐水洗涤红细胞3遍，然后加入抗人球蛋白抗体(二抗)混合离心，最后用显微镜观察凝集判读结果。由于测定过程过于复杂，目前大多医院均采用微柱凝胶卡方法，可以省略红细胞洗涤和显微镜判读结果的步骤，但整个过程依然耗时长、步骤繁琐、费用高。

申请人从事血型研究20多年，一直认为临床实验室孕妇产前血清IgG抗-A、抗-B抗体效价的测定，耗费了常规岗位工作人员过多的时间和精力，且差错或失准时常发生，因此传统的测定方法亟待改进或被替代。

免疫层析试纸条技术广泛用于各种抗原、抗体的检测，经过反复构思和验证，本专利克服多方面的技术障碍，成功用免疫层析试纸条技术测定孕妇产前免疫性IgG抗-A和抗-B抗体效价和人血型反定型。

发明内容

本发明的目的在于克服上述不足之处，提供一种测定孕妇IgG抗-A和抗-B血型抗体和人血型反定型的免疫层析试纸条。