[发明专利]细胞冻存液及细胞冻存方法有效
申请号: | 201710448188.X | 申请日: | 2017-06-14 |
公开(公告)号: | CN107027743B | 公开(公告)日: | 2020-12-29 |
发明(设计)人: | 王旭;林洁璇;李陶;林词雄;朱刚 | 申请(专利权)人: | 沃昕生物科技(深圳)有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 深圳市深佳知识产权代理事务所(普通合伙) 44285 | 代理人: | 王仲凯 |
地址: | 518000 广东省深圳市宝安区新安*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 冻存液 方法 | ||
1.一种脂肪干细胞冻存液,其特征在于,包括基础培养基、血小板裂解物、bFGF和L-谷氨酰胺;所述血小板裂解物在所述脂肪干细胞冻存液的体积百分比为5%;所述bFGF在所述脂肪干细胞冻存液的浓度为50ng/ml;所述L-谷氨酰胺在所述脂肪干细胞冻存液的浓度为4mmol/L;所述脂肪干细胞冻存液还包括羟乙基淀粉、海藻糖、羧甲基纤维素钠和甘油;所述羟乙基淀粉在所述脂肪干细胞冻存液的体积百分比为1%~5%,所述海藻糖在所述脂肪干细胞冻存液的体积百分比为1%~5%,所述羧甲基纤维素钠在所述脂肪干细胞冻存液的体积百分比为0.05%~0.1%,所述甘油在所述脂肪干细胞冻存液的体积百分比为5%~20%;所述基础培养基为DMEM/F12。
2.一种脂肪干细胞冻存方法,其特征在于,包括:
1)配置如权利要求1所述的脂肪干细胞冻存液;
2)将脂肪干细胞与步骤1)的冻存液按照5×106个/ml~1×107个/ml的密度混合,得到混合物;
3)将步骤2)的混合物置于-80℃冻存8-24h后转存于液氮保存;
或,将步骤2)的混合物置于4℃冻存40min,然后放入-20℃冻存2h,再放入-80℃冻存3h,最后转入液氮中保存。
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