[发明专利]一种蛹虫草线粒体基因型的检测方法在审
| 申请号： | 201710451715.2 | 申请日： | 2017-06-15 |
| 公开（公告）号： | CN107227353A | 公开（公告）日： | 2017-10-03 |
| 发明（设计）人： | 张永杰;赵宇翔;张姝 | 申请（专利权）人： | 山西大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 山西五维专利事务所(有限公司)14105 | 代理人： | 张福增 |
| 地址： | 030006 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 虫草 线粒体 基因型 检测 方法 | ||
1.一种蛹虫草线粒体基因型的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)利用已知线粒体基因型的蛹虫草菌株，设计扩增8个线粒体内含子位点的引物，通过PCR扩增分别得到在这些内含子插入位点有对应内含子的I类扩增产物和在这些内含子位点缺失内含子的II类扩增产物；
(2)纯化各扩增产物并测定浓度后，将属于同类的扩增产物按相同质量混合在一起，分别进行琼脂糖凝胶电泳，制作成DNA分子量标准I和DNA分子量标准II；所述制作DNA分子量标准I的电泳条件：0.7％的琼脂糖凝胶，电压90V，时间120min；所述制作DNA分子量标准II的电泳条件：2.0％的琼脂糖凝胶，电压100V，时间60min；
(3)取待检测的蛹虫草菌株，利用与步骤(1)相同的引物进行PCR扩增，扩增产物分别按步骤(2)中DNA分子量标准I和DNA分子量标准II的琼脂糖凝胶电泳条件进行电泳，通过与DNA分子量标准I和DNA分子量标准II的比较，获知待检测的蛹虫草菌株的线粒体基因型。
2.如权利要求1所述的一种蛹虫草线粒体基因型的检测方法，其特征在于，所述的PCR扩增使用的引物分别为：CM-rnl-i1F1/CM-rnl-i1R1、CM-rnl-i2F1/CM-rnl-i2R1、CM-rnl-i3F1/CM-rnl-i3R1、CM-rnl-i4F1b/CM-rnl-i4R1b、CM-cob-F1/CM-cob-R1、CM-cox1-F1/CM-cox1-R1、CM-cox2-F1/CM-cox2-R1、CM-cox3-F1/CM-cox3-R1。
3.如权利要求1或2所述的一种蛹虫草线粒体基因型的检测方法，其特征在于，所述的已知线粒体基因型的蛹虫草菌株至少为V40-5和CM09-31-28或CM06。
4.如权利要求1-3任一所述的一种蛹虫草线粒体基因型的快速检测方法，其特征在于，所述的PCR扩增使用的DNA聚合酶为EasyTaq PCR SuperMix、KOD Plus Neo或KOD FX Neo。
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