[发明专利]一种大黄鱼干扰素IFN1启动子、核酸构建体、细胞及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种大黄鱼干扰素IFN1启动子，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，或者为与SEQ ID NO：1互补的核苷酸序列。

2.一种核酸构建体，包含权利要求1所述的IFN1启动子，与IFN1启动子可操作连接的基因序列，其中所述IFN1启动子与所述基因序列来源相同或者不同。

3.一种载体，其特征在于：所述载体含有权利要求1所述的IFN1启动子或权利要求2所述的核酸构建体。

4.权利要求3的载体，其特征在于：所述载体为权利要求1所述的IFN1启动子或权利要求2所述的核酸构建体与真核表达载体经重组得到的重组载体；优选的，真核表达载体为pGL4.17质粒。

5.一种重组细胞，其特征在于：所述细胞含有权利要求1所述的IFN1启动子或权利要求2所述的核酸构建体或权利要求3或4所述的载体，所述重组细胞为鱼类细胞或哺乳动物细胞；优选的，鱼类细胞为EPC细胞。

6.一组引物对，所述引物对用于扩增得到权利要求1所述的IFN1启动子，其特征在于：所述引物对的两条引物为SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5所示的序列；优选的，所述引物对的两条引物在SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5所示序列的5’端还分别连接有限制性酶切位点和/或保护碱基；优选的，所述引物对的两条引物分别为SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的序列。

7.一种制备SEQ ID NO：1所述的IFN1启动子的方法，包括

以大黄鱼基因组DNA为模板，使用一对扩增引物进行扩增，所述扩增引物根据SEQ ID NO：1在大黄鱼基因组DNA中的序列分别针对首尾进行设计。

8.权利要求7的方法，其特征在于，所述扩增引物为权利要求6-7任一所述的引物对。

9.一种调控鱼类或哺乳动物中高效表达外源基因的方法，所述方法包括，将权利要求1所述的启动子或权利要求2所述的核酸构建体或权利要求3或4所述的载体或权利要求5所述的重组细胞导入鱼类或哺乳动物；优选的，所述鱼类为大黄鱼。

10.权利要求1所述的启动子、或权利要求2所述的核酸构建体、或者权利要求3或4所述的载体、或权利要求5所述的重组细胞、或含有权利要求1所述的启动子或权利要求2所述的核酸构建体或权利要求3或4所述的载体或权利要求5所述的重组细胞的鱼类或哺乳动物在调控目的基因表达或转基因鱼中的用途；优选的，所述鱼类为大黄鱼。