[发明专利]一种含血清的角膜上皮细胞培养液

权利要求书

1.一种含血清的角膜上皮细胞培养液，其特征在于，所述含血清的角膜上皮细胞培养液由培养液1和培养液2组成；

其中，所述培养液1包括基础培养基、浓度为10％-20％的胎牛血清，以及浓度为1-10μM的细胞增殖分化调节因子维甲酸和甘醇酸，所述培养液1用于培养原代角膜上皮细胞；

所述培养液2包括所述基础培养基、浓度为1％-5％的胎牛血清，浓度为1-5μM的细胞增殖分化的调节因子维甲酸、甘醇酸、Rock抑制剂Y27632和CaCl2，浓度为5-15μg/ml的胰岛素和转铁蛋白，以及浓度为5-20ng/ml的表皮生长因子EGF、胰岛素生长因子IGF-I、转化生长因子TGFβ、牛垂体提取物BPE和贴壁因子纤连蛋白，所述培养液2用于培养经过所述培养液1培养后的传代角膜上皮细胞；

所述基础培养基为K-SFM培养液或者MCDB153培养液或者F12/DMEM培养液，其中，所述F12/DMEM培养液是F12培养液和DMEM培养液以体积比1:3的比例混合的。

2.根据权利要求1所述的含血清的角膜上皮细胞培养液，其特征在于，所述培养液1中胎牛血清的浓度为15％，所述培养液2中胎牛血清的浓度为2.5％。

3.根据权利要求1所述的含血清的角膜上皮细胞培养液，其特征在于，所述培养液1中细胞增殖分化的调节因子维甲酸和甘醇酸的浓度为5μM。

4.根据权利要求1所述的含血清的角膜上皮细胞培养液，其特征在于，所述培养液2中细胞增殖分化的调节因子维甲酸、甘醇酸、Rock抑制剂Y27632和CaCl2的浓度为5μM。

5.根据权利要求1所述的含血清的角膜上皮细胞培养液，其特征在于，所述培养液2中表皮生长因子EGF、胰岛素生长因子IGF-I、转化生长因子TGFβ、BPE和贴壁因子纤连蛋白的浓度为10ng/ml。

6.根据权利要求1所述的含血清的角膜上皮细胞培养液，其特征在于，所述培养液2中胰岛素和转铁蛋白的浓度为10ug/ml。

7.根据权利要求1所述的含血清的角膜上皮细胞培养液，其特征在于，

所述培养液1是按照在所述基础培养液中先添加浓度为1-10μM的细胞增殖分化调节因子维甲酸和甘醇酸，再添加浓度为10％-20％的胎牛血清后形成的；

所述培养液2是按照在所述基础培养液中依次添加浓度为1-5μM的细胞增殖分化的调节因子维甲酸、甘醇酸、Rock抑制剂Y27632和CaCl2，浓度为5-15μg/ml的胰岛素和转铁蛋白，以及浓度为5-20ng/ml的表皮生长因子EGF、胰岛素生长因子IGF-I、转化生长因子TGFβ、BPE和贴壁因子纤连蛋白，再添加浓度为1％～5％的胎牛血清后形成的。