[发明专利]还原性糖链的靶板衍生化和MALDI-TOF-MS分析方法

权利要求书

1.一种还原性糖链的靶板衍生化方法，其包括以下步骤：

(1)试剂配制

配置基质DHB溶液，将还原性糖链样品溶于水中得到还原性糖链溶液，将吉拉德试剂T溶解于甲醇、乙酸和水的混合溶剂中得到酸性的吉拉德试剂T溶液，在靶板点样时，取样量相同的情况下，吉拉德试剂T溶液与还原性糖链溶液的质量浓度比大于3.9：1；

(2)点样

分别取基质DHB溶液、还原性糖链溶液、吉拉德试剂T溶液各0.5μL，依次点在MALDI-TOF-MS仪器靶板的同一点上；

(3)干燥

点样后的靶板在室温下放置0.5小时，样品点完全干燥；

还原性糖链溶液的质量浓度为3.42mg/mL；

用于溶解吉拉德试剂T的甲醇、乙酸和水的混合溶剂，其中，甲醇和水体积比为1：6～1：8时，在混合溶剂中添加10％～30％(v/v)的乙酸，至混合溶剂的pH＝3～6。

2.根据权利要求1所述的还原性糖链的靶板衍生化方法，其特征在于，

用于溶解还原性糖链的水是超纯水或双蒸水；

用于溶解基质DHB的溶剂是体积比为CH₃CN：0.1％的TFA水溶液＝1：1的混合溶剂，基质DHB溶液的浓度为20.00mg/mL。

3.经权利要求1靶板衍生化方法得到的靶板点样样品的MALDI-TOF-MS分析方法，其特征在于，采用的检测模式为反射模式或线性模式；

设定平滑滤过器宽度为30chans；

设定基线滤过器宽度为90chans。

4.根据权利要求3所述的MALDI-TOF-MS分析方法，其特征在于，还设定以下检测参数：

分子量范围为500～10000(m/z)；

工作系统为氮气激光355nm；

频率为40.0Hz；

加速电压为20kv；

压力为1×10^-6Torr；

激光在每个靶点上2个不同位置照射累计1000次；

能量为90mV～105mV。