[发明专利]一种诱导菌剂及应用其缓解反刍动物瘤胃酸中毒的方法

说明书

本发明公开了一种诱导菌剂及应用其缓解反刍动物瘤胃酸中毒的方法。从菌株的种子培养到诱导全程保持厌氧，步骤简单，操作方便，诱导过程中不需要进行特殊气体的补充，以乳酸为唯一碳源，节约了生产成本并能够获得较高适应性及乳酸分解能力的M.elsdeniiLC1菌株，瘤胃灌注酸中毒反刍动物，缓解瘤胃酸中毒，具有重大的生产实践应用价值及经济效益。

技术领域

本发明属于应用微生物技术领域，具体涉及一种M. elsdeniiLC1诱导菌剂及应用其缓解反刍动物瘤胃酸中毒的方法。

背景技术

现代集约化反刍动物养殖过程中，为了追求高生产性能，通常过量使用谷物饲料作为反刍动物的饲粮。富含大量谷物的饲粮饲喂反刍动物一定程度上显著地提高了其生产性能，但由于反刍动物瘤胃生理的特殊性，过量的谷物饲粮容易导致瘤胃微生物发酵失衡，具体表现为：乳酸等有机酸的大量产生与瘤胃微生物及瘤胃上皮的吸收失衡，有机酸在瘤胃中累积，引起瘤胃pH值降低，诱导酸中毒的发生。反刍动物瘤胃酸中毒能够诱发蹄叶炎、瘤胃上皮脱落、拉稀等临床症状，如不能够及时的发现并有针对性地治疗，将会直接影响反刍动物的生产、繁殖及使用周期，造成直接经济损失。

现有缓解瘤胃酸中毒的方法主要分为缓冲法盐和微生物菌剂法。缓冲盐法主要指的是通过饲喂小苏打等弱碱性类缓冲盐，从而达到提高瘤胃pH的目的，短期内具有明显的效果，但是并不能从本质上缓解酸中毒，因为并没有起到减少有机酸的量或改变瘤胃有机酸组成模式的作用；微生物菌剂法主要指饲喂埃氏巨型球菌（Megasphaera elsdenii）等乳酸利用菌，从而达到调节瘤胃发酵模式，减少瘤胃乳酸累积，提高瘤胃pH，最终缓解瘤胃酸中毒的目的。但目前问题在于，目前市场上菌剂因为适应性差等原因造成使用效果不佳。为此开发高适应性M. elsdenii菌剂以缓解瘤胃酸中毒十分必要。

发明内容

本发明的目的是通过对M. elsdenii LC1菌株进行低营养富集诱导，提高其适应性及乳酸分解能力，达到利用其缓解高淀粉饲粮诱导瘤胃酸中毒的目的，具体为一种高适应性M. elsdenii诱导及应用其缓解瘤胃酸中毒的方法。

本发明涉及的涉及菌株为ATCC标准菌株，菌株号为：ATCC25940，获取网址为：https://www.atcc.org/products/all/25940.aspx

实现本发明目的的技术方案是：

一种M. elsdeniiLC1诱导菌剂，所述菌剂的制备过程为：在厌氧工作站进行种子培养后，取出种子培养液，向高营养诱导培养基中直接接种种子培养液进行高营养富集诱导，后接种至中营养诱导培养基进行中营养富集诱导，最后接种至低营养诱导培养基进行低营养富集诱导，得到M. elsdeniiLC1诱导菌剂；诱导过程中诱导罐密闭且无需通入其他气体，以乳酸为发酵底物，进行底物不同乳酸浓度的梯度诱导，诱导全过程保持厌氧。

进一步地，所述种子培养过程为：取出冻存的M. elsdeniiLC1菌株种子细菌液，以1%的接种量接种种子培养基，36~39℃厌氧培养，所述培养时间为8到10小时，待到种子培养基浑浊度OD值为0.38~0.42时，取出种子培养液接种到新的种子培养基中继续培养，所述培养时间为8到10小时，再次待到培养液浑浊度OD值为0.38~0.42时，取出种子培养液进行高营养富集诱导。