[发明专利]一种甜茶苷制备方法

权利要求书

1.一种甜茶苷制备方法，包括如下步骤：

(1)取甜茶叶干燥品，粉碎，过40-60目筛，将过筛后的甜茶叶粉料放入闪式提取器，加入甜茶叶粉料18-20倍重量的水，提取3次，每次1分钟，合并3次提取液得到总提取液；

(2)将总提取液浓缩到甜茶叶原料5倍重量的浓缩液，浓缩液先通过碟式离心机离心，再过管式离心机离心，得到离心液并用酸调pH 至5.0-6.0；

(3)调好pH 值的离心液进大孔树脂柱，流出液用浓度为0.2％的氢氧化钠溶液调到pH＝7.0，检测甜茶苷含量1％为进柱终点；进液完毕后，首先用纯水洗柱，洗至流出液无色，澄清，再用碱液洗柱，洗至流出液pH ＝11.0-12.0，第三用纯水洗柱，洗至流出液pH ＝7.0-7.5，第四用酸液洗柱，洗至流出液pH ＝2.0-2.5，最后用水洗柱，洗至流出液pH ＝7.0；

(4)用浓度为45％-50％的乙醇溶液解吸，流出液从检测甜茶苷1％时开始收集，到检测甜茶苷1％时为止，将流出液减压浓缩制成5波美度的纯化的浓缩液；

(5)向步骤(4)制得的浓缩液加入生物酶，在45-60℃温度下酶解1-3小时,得到酶解液；

(6)将酶解液过有机膜，先过8000分子量的有机膜，进膜压力0.45—0.5MPa，再过800分子量的有机膜，进膜压力1.8—2.0MPa，得脱色过膜液；

(7)将过膜液减压浓缩制成15波美度的稠膏，加入稠膏3倍量的甲醇或乙醇作为溶剂，在5-11℃下结晶8-14小时，得晶体干燥，得到甜茶苷。

2.根据权利要求1所述的一种甜茶苷制备方法，其特征在于，步骤(2)所述的碟式离心机离心时间为30-50分钟，所述的管式离心机离心时间为40-60分钟。

3.根据权利要求1所述的一种甜茶苷制备方法，其特征在于，步骤(3)所述的碱液选用浓度为0.2％的氢氧化钠水溶液或浓度为0.2％的氢氧化钾水溶液；所述的酸液选用浓度为0.4％的盐酸水溶液或浓度为0.45％的硫酸水溶液。

4.根据权利要求1所述的一种甜茶苷制备方法，其特征在于，在步骤(3)中所述的大孔树脂柱选用T-28树脂或H-30树脂中的一种。

5.根据权利要求1所述的一种甜茶苷制备方法，其特征在于，步骤(5)中所述的生物酶选自菠萝蛋白酶、果胶酶、中性蛋白酶中的1种或2种以上的组合。

6.根据权利要求5所述的一种甜茶苷制备方法，其特征在于，生物酶添加量为甜茶叶总重量的0.5‰—1.2‰。

7.根据权利要求5所述的一种甜茶苷制备方法，其特征在于，生物酶添加量为甜茶叶总重量的0.6‰—0.8‰。

8.根据权利要求5所述的一种甜茶苷制备方法，其特征在于，所述的生物酶为果胶酶与中性蛋白酶的组合，其混合比例为果胶酶:中性蛋白酶＝5:1。

9.根据权利要求5所述的一种甜茶苷制备方法，其特征在于，所述的生物酶为果胶酶与菠萝蛋白酶的组合，其混合比例为果胶酶:菠萝蛋白酶＝1:1。

10.根据权利要求5所述的一种甜茶苷制备方法，其特征在于，所述的生物酶为中性蛋白酶与菠萝蛋白酶的组合，其混合比例为中性蛋白酶:菠萝蛋白酶＝4:1。