[发明专利]一种高尿酸血症的基因治疗药物

说明书

本发明提供一种重组腺相关病毒介导的高尿酸血症治疗药物。重组腺相关病毒载体携带包含人miR‑142‑3p靶序列的人为设计尿酸氧化酶（artificial urate oxidase，简称AUO）基因表达框。体内实验表明，该重组腺相关病毒载体能够高效地导入体内，持续稳定地表达尿酸氧化酶，降低尿酸含量，有效地缓解因血液中尿酸过高导致的痛风症状。结果提示，该重组腺相关病毒载体有希望开发成为一种新的高尿酸血症治疗药物。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种重组腺相关病毒载体携带人为设计尿酸氧化酶（AUO）基因表达框的高尿酸血症基因治疗药物。

背景技术

随着经济水平的提高和人们生活方式及膳食结构的改变，痛风和高尿酸血症的发病率在世界范围内呈逐年上升趋势（郭立新.药品评价. 2014; 11(1): 21-23. WeaverAL. Cleve Clin J Med. 2008; 75(s5): s9-s12.）。高尿酸血症是由嘌呤代谢紊乱导致尿酸生成增多和（或）排泄减少，使血液中尿酸浓度高出正常范围所致，是痛风发病的生化基础（张玉梅，等. 医学综述. 2012; 18(15): 2441-2444.），临床诊断标准为正常嘌呤饮食状态下，男性血液尿酸含量＞420 μmol/L，女性血液尿酸含量＞360 μmol /L（Prasad SahOS, et al. Nephrourol Mon. 2015; 7(3): e27233.）。高尿酸血症通常与高脂血症、高血压病、2型糖尿病、肥胖症、动脉粥样硬化、冠心病等疾病伴发，且与血管、心脏、肾脏不良预后密切相关，严重危害人类健康（Susic D, et al. Cardiorenal Med. 2015; 5(3): 175-182.）。

尿酸（uric acid，UA）是一种弱酸（pKa = 5.8），是嘌呤代谢的最终氧化产物，在生理pH条件下，主要以尿酸盐离子形式存在。在正常状态，体内的尿酸60%～70% 经肾脏排泄，约30%被肠道内细菌分解或经胆道排泄，约1%经汗液排出。研究证明，尿酸在肌体内有双重作用，既是肌体内最重要的一种抗氧化剂，具有抗氧化应激的作用，又可损害血管内皮功能，诱发血管炎症（Lioté F, et al. Rheum Dis Clin North Am. 2006; 32(2): 295-311. Lippi G, et al. Clin Chim Acta. 2008; 392(1-2): 1-7.）。

尿酸氧化酶（urate oxidase）可以催化尿酸氧化成尿素囊。研究发现，许多物种体内均存在这种酶，然而在人类和猿类等高等动物体内却缺乏这种有生物活性的尿酸氧化酶（朱献军，等. 生物工程学报. 2001; 17(1): 68-72.）。肝脏是尿酸形成的重要器官，肾脏是尿酸排泄的重要器官，如果肝脏尿酸产生过多或肾脏尿酸排泄量过少，可使体内血尿酸水平升高，从而导致高尿酸血症。血液中98%的尿酸以钠盐形式存在，当血中尿酸浓度超过其在血液中的最大溶解度时，尿酸盐会析出针状结晶，沉积在肾脏、皮下软组织、关节滑膜、滑囊、软骨等酸度较高的组织或温度较低的远侧端肢体，引起一系列病理反应尿酸盐呈结节状硬结，称痛风石。在肾脏排泄尿酸的过程中，若尿酸盐沉积在肾间质中，可引起间质纤维化、尿酸性肾病，甚至可导致肾小管萎缩。

经循证医学研究证实，肾脏对尿酸的清除率下降使得血尿酸水平升高，与高血压、高血脂、胰岛素抵抗、动脉粥样硬化及冠心病等疾病的发生和进展密切相关。因此控制体内的尿酸浓度，使其维持在正常水平具有重要的生理意义。

高尿酸血症是一种复合性的代谢综合征，其发病机制涉及多种基因遗传，如某些酶基因突变，使其活性在嘌呤的分解代谢过程中发生改变，致使体内血尿酸浓度升高，导致高尿酸血症的发生。按照发病机制的不同，可以分为原发性高尿酸血症和继发性高尿酸血症。原发性高尿酸血症属于遗传性疾病，常由基因缺陷引起。血清尿酸浓度以及肾脏对尿酸的调节都具有显著遗传性，是由多个基因和环境因素共同调控的。继发性高尿酸血症的病发原因有很多，主要由血液病、肾脏病和药物治疗等因素引起。