[发明专利]一种表达猪小肠抗菌肽PF1基因的重组乳酸克鲁维酵母及构建方法在审
| 申请号： | 201710467627.1 | 申请日： | 2017-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN107841469A | 公开（公告）日： | 2018-03-27 |
| 发明（设计）人： | 曹远东;潘烘;周志;周华娇;张燕;焦贺勋 | 申请（专利权）人： | 江西嘉博生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/66;C12N15/12;C12R1/645 |
| 代理公司： | 南昌新天下专利商标代理有限公司36115 | 代理人： | 谢德珍 |
| 地址： | 332600 江西省九江*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 表达 小肠 抗菌 pf1 基因 重组 乳酸 克鲁 酵母 构建 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种表达猪小肠抗菌肽PF1基因的重组乳酸克鲁维酵母，其特征在于，所述重组乳酸克鲁维酵母为PF1-pKLAC2-GG799。
2.根据权利要求1所述的一种表达猪小肠抗菌肽PF1基因的重组乳酸克鲁维酵母，其特征在于，包含权利要求 1 所述基因的乳酸克鲁维酵母质粒pKLAC2。
3.根据权利要求1所述的一种表达猪小肠抗菌肽PF1基因的重组乳酸克鲁维酵母，其特征在于，包含权利要求 2 所述质粒的乳酸克鲁维酵母为GG799。
4.根据权利要求1所述的一种表达猪小肠抗菌肽PF1基因的重组乳酸克鲁维酵母的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
按乳酸克鲁维酵母密码子优化合成猪小肠抗菌肽PF1基因；
将猪小肠抗菌肽PF1基因与乳酸克鲁维酵母质粒pKLAC2同时双酶切反应、琼脂糖凝胶电泳回收，并进行4℃过夜连接，将连接产物转化大肠杆菌JM109，提重组质粒PF1-pKLAC2；
使用限制性内切酶SacII线性化处理重组质粒；
线性化重组质粒转化乳酸克鲁维酵母 GG799,构建重组乳酸克鲁维酵母PF1-pKLAC2-GG799。
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