[发明专利]一种植物细胞原生质体纯化仪及纯化方法有效
申请号: | 201710469421.2 | 申请日: | 2017-06-20 |
公开(公告)号: | CN107058075B | 公开(公告)日: | 2023-10-20 |
发明(设计)人: | 梁峰;梁梁;刘秀花 | 申请(专利权)人: | 商丘师范学院 |
主分类号: | C12M1/12 | 分类号: | C12M1/12;C12M1/00;C12N5/04 |
代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 俞晓明 |
地址: | 476000*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 植物 细胞 原生 质体 纯化 方法 | ||
1.一种植物细胞原生质体纯化仪,其特征在于,包括电泳池,所述电泳池内从上到下依次划分为加样室(1)、滴漏室(2)和电泳室(3),所述滴漏室(2)为漏斗形状,所述加样室(1)与所述滴漏室(2)连通、并且所述滴漏室(2)上端与所述加样室(1)通过滤膜(11)隔开,所述电泳室(3)的左侧设置有负电极(31),右侧设置有正电极(32),所述电泳室(3)的底部从左至右分别连通有细胞碎片收集盘(4)、原生质体收集盘(5)和叶绿体收集盘(6),所述细胞碎片收集盘(4)位于所述滴漏室(2)的下方,所述叶绿体收集盘(6)靠近所述正电极(32)设置,所述电泳室(3)内还纵向设置有滤网(33),所述滤网(33)位于原生质体收集盘(5)的右侧壁上方。
2.根据权利要求1所述的植物细胞原生质体纯化仪,其特征在于,所述滤膜(11)的孔径φ为50-100微米。
3.根据权利要求1所述的植物细胞原生质体纯化仪,其特征在于,所述滤膜(11)搁置在滴漏室(2)上端端口处。
4.根据权利要求1所述的植物细胞原生质体纯化仪,其特征在于,所述滤网(33)的孔径φ为10微米。
5.根据权利要求1所述的植物细胞原生质体纯化仪,其特征在于,所述电泳室(3)的上端靠近所述正电极(32)处开设有滤网插孔,并且电泳室(3)的两个相对的侧壁上分别开设有滤网滑槽(331),所述滤网(33)的宽度小于所述滤网插孔的长度,所述滤网(33)的厚度小于所述滤网插孔的宽度,并且所述滤网(33)的两侧与两个滤网滑槽(331)一一对应滑动连接。
6.根据权利要求1所述的植物细胞原生质体纯化仪,其特征在于,所述电泳池的外部还设置有直流电泳仪(7),并且所述直流电泳仪(7)的负极与所述负电极(31)电连接,正极与所述正电极(32)电连接。
7.根据权利要求1所述的植物细胞原生质体纯化仪,其特征在于,所述细胞碎片收集盘(4)、所述原生质体收集盘(5)和所述叶绿体收集盘(6)均可拆卸的连接在所述电泳室(3)的底部,具体结构为:所述电泳室(3)的底部从左至右分别连通有细胞碎片流通管、原生质体收流通管和叶绿体流通管,所述细胞碎片收集盘(4)的开口端与所述细胞碎片流通管底部螺接,所述原生质体收集盘(5)的开口端与所述原生质体收流通管底部螺接,所述叶绿体收集盘(6)的开口端与所述叶绿体流通管底部螺接。
8.根据权利要求7所述的植物细胞原生质体纯化仪,其特征在于,所述细胞碎片收集盘(4)与所述细胞碎片流通管之间、所述原生质体收集盘(5)与所述原生质体收流通管之间,所述叶绿体收集盘(6)与所述叶绿体流通管之间均设置有密封圈。
9.根据权利要求1所述的植物细胞原生质体纯化仪的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1,电泳室(3)内装满0.5mol/L的甘露醇缓冲液,将直流电泳仪(7)的电场强度调节在1.5-5v/cm,进行电泳;
S2,电泳开始后,将制备好的原生质体混合物悬浮液按照6-12滴/分钟的速度滴加入加样室(1)内直至滴加完毕,然后继续电泳30min;
S3,关闭电源,收集原生质体收集盘(5)内的原生质体。
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