[发明专利]一种锁核酸修饰的LAMP引物组合物及其应用在审
| 申请号： | 201710471433.9 | 申请日： | 2017-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN107338289A | 公开（公告）日： | 2017-11-10 |
| 发明（设计）人： | 曹国君;关明;方雪恩;周连群;张威;康志华;邓萱;赵缜;邢志芳;孔继烈 | 申请（专利权）人： | 复旦大学附属华山医院;复旦大学;中国科学院苏州生物医学工程技术研究所;上海速创诊断产品有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海申新律师事务所31272 | 代理人： | 竺路玲 |
| 地址： | 200040 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 核酸 修饰 lamp 引物 组合 及其 应用 | ||
1.一种锁核酸修饰的LAMP引物组合物，包括F3/B3引物和FIP/BIP引物和/或LF/LB引物，其特征在于，在该LAMP引物组合物中，锁核酸的修饰位置为引物的3’端。
2.根据权利要求1所述的LAMP引物组合物，其特征在于，锁核酸修饰的引物为FIP引物和BIP引物。
3.根据权利要求2所述的LAMP引物组合物，其特征在于，所述锁核酸的修饰位置为引物的3’端最外侧的3个碱基中的至少一个。
4.一种含有权利要求1～3中任一项所述的LAMP引物组合物的环介导等温扩增体系。
5.根据权利要求4所述的环介导等温扩增体系，其特征在于，所述环介导等温扩增体系包含甲酰胺。
6.根据权利要求5所述的环介导等温扩增体系，其特征在于，在所述环介导等温扩增体系中，所述甲酰胺的浓度为0.1vl％-10vl％。
7.根据权利要求4所述的环介导等温扩增体系，其特征在于，所述环介导等温扩增体系含有热启动酶。
8.一种采用权利要求1～3中任一项所述的锁核酸修饰的LAMP引物组合物的核酸扩增方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1)待检样品核酸提取；
步骤2)恒温扩增反应：将步骤1)获得的待检样品DNA加入含有锁核酸修饰的LAMP引物组合物的环介导等温扩增体系中进行恒温扩增反应；
步骤3)结果判读：扩增结束后结合特定仪器检测核酸扩增曲线进行判读。
9.根据权利要求8所述的核酸扩增方法，其特征在于，所述步骤2)中环介导等温扩增体系中还包含甲酰胺和热启动酶。
10.根据权利要求8所述的核酸扩增方法，其特征在于，所述步骤2)恒温扩增反应的反应温度为58℃-72℃。
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