[发明专利]一种肿瘤免疫治疗预测生物标志物PD-L1靶向多肽及其应用

说明书

本发明涉及一种肿瘤免疫治疗预测生物标志物PD‑L1靶向多肽及其应用，所述多肽通式为：X₁FX₂X₃X₄X₅X₆X₇X₈KX₉C。本发明还涉及编码该多肽的DNA片段，表达该多肽的表达载体及宿主细胞，由该多肽形成的二价体、多价体或药物组合物。本发明制备方法简单、成本低廉，实用性强；用于检测肿瘤细胞中PD‑L1的表达情况，以实时监控免疫治疗的疗效及其相应的受益患者筛选。本发明的多肽可为多种肿瘤早期诊断和免疫治疗中检查点的动态监测等提供重要的理论和临床参考依据，优化个体患者的治疗方案有着重要的意义和应用价值。

技术领域

本发明涉及医学生物检测技术和药物化学领域，具体涉及PD-L1肿瘤特异性靶向多肽筛选及其应用，尤其涉及一种肿瘤免疫治疗相关靶向多肽的制备方法及其应用。

背景技术

近年来，随着肿瘤学、免疫学以及分子生物学等相关学科的快速发展和相互渗透，肿瘤免疫治疗的研究和发展变得突飞猛进。肿瘤免疫治疗成为新一种重要的抗肿瘤治疗手段，与以往的手术治疗、化学治疗、放射治疗和靶向治疗不同，肿瘤免疫治疗是一种通过激活人体自身免疫系统来对抗肿瘤的治疗手段，也成为了攻克恶性肿瘤的新希望。肿瘤免疫治疗的核心是激活肿瘤患者T淋巴细胞的抗肿瘤反应，以提高其对肿瘤细胞的杀伤功能。T细胞对肿瘤细胞有明确的靶向性和特异性，能通过识别并聚集到肿瘤抗原表达的部位而产生长程免疫应答反应，直接抑制和杀伤肿瘤细胞。树突状细胞(dendritic cell，DC)在T细胞识别过程中发挥至关重要的作用，可作为肿瘤治疗工具，这使通过免疫干预实现肿瘤治疗成为可能。

目前，随着对肿瘤免疫逃逸机制研究的不断深入，针对免疫检查点的抑制剂在多种实体瘤的治疗中表现出了较好的临床效果，成为癌症治疗史上里程碑式的事件，使人们认识到免疫治疗能够真正成为恶性肿瘤治疗的重要角色。肿瘤免疫治疗有多种治疗策略，包括非特异性免疫刺激剂、肿瘤疫苗、过继性免疫细胞疗法，以及单抗治疗。由于肿瘤具有极大的异质性和遗传不稳定性，其发病机制复杂，单独依靠某一种治疗手段难以达到理想的抗肿瘤效果，因此在深入研究不同治疗手段之间相互作用机制的基础上，联合肿瘤靶向治疗和不同类型免疫治疗的抗肿瘤策略有可能是未来肿瘤免疫治疗的发展方向。

T细胞介导的细胞免疫在识别和杀伤肿瘤细胞的过程中起着重要的作用，T细胞通过T细胞受体与肿瘤细胞表面的带有特异性抗原的主要组织相容性复合体(MHC)结合，从而识别肿瘤细胞。TCR和MHC分子的相互作用受到一系列免疫检查点的控制，可以使T细胞激活或抑制。其中PD-1和其配体PD-L1通路是抑制性免疫检查点，它们结合可以使T细胞的免疫活性受到抑制，在免疫耐受中发挥重要作用，这也是肿瘤细胞免疫逃逸的重要原因。

程序性死亡配体-1(Programmed death receptor ligand-1,PD-L1,又称为B7-H1)是典型的负性协同刺激分子，在1992年首次作为基因被发现并进行了克隆，其可转录诱导T细胞程序化死亡，是目前免疫学研究领域的热门对象之一。PD-L1属于B7家族的Ⅰ型跨膜蛋白，是程序性死亡因子-1(Programmed death-1,PD-1)的配体。主要表达于抗原提呈细胞、B细胞、T细胞、上皮细胞、肌细胞、内皮细胞及各种肿瘤细胞，并参与肿瘤相关的免疫反应。PD-L1是由290个氨基酸亚基组成的跨膜蛋白，胞外段为两个免疫球蛋白恒定区(Ig C)和Ig V样结构域。在肿瘤免疫微环境中，PD-L1作为一个代表性的负性共刺激分子，其通过与T淋巴细胞表面PD-1结合，诱导免疫受体酪氨酸抑制基序的磷酸化，在体内、体外均能促进抗原特异性人类T细胞克隆的凋亡，抑制T细胞的增殖分化和诱导效应T细胞的耗竭。肿瘤细胞可异常上调PD-L1以及PD-1的表达，抑制T细胞的免疫活性，造成肿瘤免疫逃逸，导致肿瘤发生、发展。高表达PD-L1的患者预后差，生存率低。因此，通过阻断PD-1/PD-L1信号通路，重新激活机体免疫系统对肿瘤的杀伤作用，改造肿瘤赖以生存的“土壤”成为了新的恶性肿瘤治疗热点。