[发明专利]一种磁性人工受体及其制备方法和应用

权利要求书

1.磁性人工受体在筛选虎杖潜在抗脑卒中活性成分中的应用，其特征在于制备Fe₃O₄磁性纳米粒：取FeCl₃·6H₂O 4.72 g 溶解于80 mL去离子水中，通氮气除氧15 min，氮气保护下，边搅拌边加入FeCl₂·4H₂O 1.72g，升高温度至80 ℃，逐滴加入氨水10 mL，继续反应1h，剧烈搅拌下加入2 mL PEG-200溶液，反应10 min；利用磁性分离出Fe₃O₄纳米粒，去离子水洗至中性，分散于乙醇中备用；Fe₃O₄@SiO₂复合颗粒的制备：取干燥的Fe₃O₄磁性纳米粒0.3 g超声分散于50 mL乙醇中，加入去离子水2 mL，氨水2 mL以200 r/min速度机械搅拌均匀，以20 μL/min的速度滴加TEOS 5mL ，室温下搅拌反应12 h，产物磁性分离，用去离子水洗至中性，室温真空干燥后备用；Fe₃O₄@SiO₂@MPS 复合颗粒的制备：取上述Fe₃O₄@SiO₂复合颗粒0.5g超声分散于50 mL甲苯中，充入氮气除氧15 min，加入MPS10 mL，500 r/min的速度机械搅拌均匀，升温至55 ℃，继续搅拌反应24 h，产物磁性分离，用甲苯洗3次，甲醇洗3次，室温真空干燥后备用；磁性人工受体的制备：将ZL006 0.23g和MAA0.36 mL超声分散于乙腈-乙醇体积比8:2的30 mL混合溶液中，室温下避光静置4 h，形成预聚合溶液；充氮气除氧15 min，加入EGDMA2.64 mL和AIBN0.13 g，500 r/min的速度机械搅拌溶解；取上述Fe₃O₄@SiO₂@MPS复合颗粒0.1 g超声分散于乙腈-乙醇体积比8:2的20 mL混合溶液中，边搅拌边加入到预聚合溶液中， 50 ℃搅拌1 h，升高温度至60 ℃，继续搅拌24 h；产物用甲醇-冰醋酸，体积比9:1，反复洗涤至ZL006完全脱去，真空干燥即得磁性人工受体；虎杖干燥后磨成粉，过200目筛，取虎杖粉末2 g加入到乙醇10 mL中加热回流1 h，粗提液过滤，补加乙醇至10 mL，再加入9倍体积的甲苯稀释得提取液；磁性人工受体100 mg超声5 min，均匀分散于虎杖提取液5mL中，将上述溶液置于振荡培养箱中150 r/min孵化2 h，磁性分离出人工受体微球；加入甲苯5 mL淋洗3次，磁性分离，去除残留液；再加入5 mL甲醇-冰醋酸，体积比为9:1，混合后置于振荡培养箱中160 r/min振荡洗脱1 h，磁性分离，收集洗脱液。