[发明专利]一种磁性人工受体及其制备方法和应用

说明书

一种磁性人工受体及其制备方法和应用，包括：(1)Fe₃O₄@SiO₂复合颗粒的制备，(2)Fe₃O₄@SiO₂@MPS复合颗粒的制备，(3)磁性人工受体的制备。本发明以ZL006为模板，在磁性纳米硅胶材料的表面设计合成有序、致密分子印记壳层，减少了印记位点被“包埋”的现象，其结合速率和分离效率较高。同时将磁性材料、纳米硅胶以及表面分子印记技术相结合，可在外磁场作用下实现对靶标物质的快速直接分离，为中药活性物质的选择性快速分离富集与检测提供了一种新的强有力手段。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种磁性人工受体及其制备方法和在高选择性、高特异性垂钓中药潜在抗脑卒中活性成分中的应用。

背景技术

脑卒中是一种突发性局部脑组织缺血导致的疾病，具有高死亡率、高致残率、高复发率的特点。FDA获准的唯一药物组织型纤溶酶原激活剂(tissue plasminogen ativator，tPA)由于时间窗狭窄，并发症危险，禁忌症限制等大大降低了使用效率，因此脑卒中药物的研发迫在眉睫。针对脑卒中损伤机制的研究发现，阻断突触后密度蛋白-95(PSD-95)与神经元型一氧化氮合酶(nNOS)的偶联，能够降低NO的释放，减轻缺血性脑卒中的神经细胞凋亡和损伤，在不影响其他神经功能的基础上发挥神经保护作用。由此设计的小分子解偶联剂ZL006具有较好的生物活性，但是ZL006脂溶性差，不易透过血脑屏障，限制了其临床使用，因此新的小分子解偶联剂成为脑卒中药物研究的热点。

近年来，中药治疗脑卒中已经取得了实际的进展，例如丹参注射液治疗出血性脑卒中以其疗效好、不良反应小等特点应用日益广泛。然而中药成分复杂，含量低和不稳定等特点限制了中药的进一步发展，因此，分离，提取中药中的有效成分是中药开发的重要内容。传统的分离提取技术在无效成分的去除和有效成分的保留上，存在操作复杂，分离时间长，效率低等不足。分子印记聚合物(molecularly imprinted polymers，MIPs)是模拟自然界中受体-抗体相互作用原理，通过分子印记技术合成的纳米聚合物材料，能够实现对模板分子或与模板分子结构相似的分子特异性识别，选择性吸附。在中药成分分离，富集，提取等方面有很好的应用前景。

磁性表面分子印记聚合物，采用沉淀聚合的方式，在聚合物的表面形成印记空穴，提高了MIP结合速率，且利用磁性加快分离效率。中国专利(申请号:201019026093.4)用6-N-(2-羟基-3,5-二氯苄基)氨基苯并三氮唑或者4-N-(2-羟基-3,5-二氯苄基)氨基水杨酸为模板，合成了PSD-95/nNOS解偶联剂分子印记聚合物，但合成的本体MIP存在刚性低、不稳定、吸附量小、操作繁琐且需要研磨，印记位点易破坏等缺陷。而以磁性Fe₃O₄为载体，ZL006为模板，制备磁性表面分子印记聚合物作为人工受体，将其用于实际样品中PSD-95/nNOS解偶联剂的垂钓尚未见报道。

发明内容

解决的技术问题：本发明提供一种磁性人工受体及其制备方法和应用，具体来说是从中药中高效、特异性垂钓nNOS-PSD-95解偶联剂的方法，实现对nNOS-PSD-95解偶联剂的选择性捕获，为找到活性显著、毒副作用小的抗脑卒中候选药物奠定基础，同时为中药活性成分的的特异性和高效筛选提供新思路和新方法。