[发明专利]一种干酪乳杆菌来源的D‑乳酸脱氢酶及其应用

权利要求书

1.一种D-乳酸脱氢酶，其特征在于，其氨基酸序列如(a)或(b)所示：

(a)氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；

(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有苯丙酮酸还原活性的由(a)衍生的蛋白质。

2.编码权利要求1所述D-乳酸脱氢酶的基因。

3.一种基因工程菌，其特征在于，以大肠杆菌为宿主，表达权利要求1所述的D-乳酸脱氢酶。

4.根据权利要求3所述的基因工程菌，其特征在于，以pET-28a(+)为载体。

5.根据权利要求3所述的基因工程菌，其特征在于，所述宿主为E.coli BL21、E.coli JM109、E.coli DH5α、或E.coli TOP10。

6.一种构建权利要求3所述基因工程菌的方法，其特征在于，是将SEQ ID NO.1所示基因与载体连接，转化至大肠杆菌细胞中。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述载体为pET-28a(+)；所述大肠杆菌为E.coli BL21(DE3)。

8.一种生产权利要求1所述D-乳酸脱氢酶的方法，其特征在于，将权利要求3所述基因工程菌接种至LB培养基中，培养至OD₆₀₀＝0.6～0.8，加入终浓度为0.4～0.5mmol/L的IPTG诱导6～10h。

9.权利要求1所述D-乳酸脱氢酶在食品、生物、医药、化工领域的应用。

10.一种苯乳酸的制备方法，其特征在于，以苯丙酮酸为底物，加入权利要求1所述的D-乳酸脱氢酶，转化生产D-苯乳酸。