[发明专利]一种抑制苹果果实油腻化发生的方法

权利要求书

1.一种抑制苹果果实油腻化发生的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、果实处理

试验设3个处理:(1)对照蒸馏水；(2)1.5g·L^-1EGCG；(3)3.0g·L^-1EGCG；三个处理均使用真空渗透法处理果实,即将果实置于真空干燥器内,密封,然后使用SHZ-3循环水多用真空泵抽至真空度为0.06Mpa,维持60s,缓慢回升至常压；果实取出后置于室温下晾干,晾干后的果实置于25℃下贮藏；每个处理设3次重复,每个重复30个果实；

步骤2、生理指标及果实品质测定

用TRACE GC ULTRA型气相色谱仪测定乙烯释放速率；方法如下:果实密闭1h后抽取气体,GDX-502色谱柱,载气N₂,柱温70℃,进样口温度70℃,氢气流量0.7kg·cm^-2,空气流量0.7kg·cm^-2,氮气流量1.0kg·cm^-2,进样量1mL,氢火焰离子化检测器检测,检测室温度150℃；

呼吸强度:用TELAIRE 7001型CO₂分析仪测定；

使用GS-15型水果质地分析仪测定果实硬度；

步骤3、油腻化程度评定

采用感官评定的方法判断果实油腻化的程度，将油腻化程度划分为4个等级:0为不发生；1为轻微；2为中度；3为重度；感官评定小组由3个经过训练且有经验的学生组成,为减少误差,选定未发生油腻化的苹果以及油腻化最严重的果实作对照,轻微触摸果实表面评定油腻化程度,并且每次触摸果实表面前将手擦拭干净；油腻化程度是3个人感官评定结果的平均值,感官评定果为固定的15个果实；

步骤4、果实蜡质组分处理；

步骤5、数据处理

试验数据分析使用Excel 2007,SAS 9.4进行统计分析,进行方差分析采用ANOVA法,多重比较采用DUNCAN法，显著性差异P<0.05。

2.根据权利要求1所述的抑制苹果果实油腻化发生的方法，其特征在于，步骤2中，使用GS-15型水果质地分析仪测定果实硬度；具体参数设定为:探头直径10mm；触发阈值0.10kg；探头下降速率10mm·s^-1；探头返回速率10mm·s^-1；测量速率5mm·s^-1；测量距离10.0mm；可滴定酸含量通过GMK-835F水果酸度测定仪测定；可溶性固形物含量使用PAL-1型手持糖度计测量。

3.根据权利要求1所述的抑制苹果果实油腻化发生的方法，其特征在于，步骤3中，每隔3d进行一次相关指标的测定工作,9d之后果实油腻化变化较缓慢,每隔4或5d进行一次相关指标的测定；综上,生理指标及果实品质测定、油腻化程度评定分别在果实贮藏0、3、6、9、13、17、21和26d时进行。

4.根据权利要求1所述的抑制苹果果实油腻化发生的方法，其特征在于，步骤4具体为：

4.1果实总蜡质的提取

分别在果实贮藏0、6、13、21和26d提取蜡质；常温下把整个果实浸入盛有400mL的三氯甲烷的烧杯中浸泡45s,每个果实提取3次,提取后将3次的浸出液混合、过滤,转移至3000mL圆底蒸馏烧瓶中使用RE-2000旋转蒸发仪在40℃条件下进行浓缩,将浓缩液转移到50mL的血清瓶中；蜡质提取液用MD200-1氮吹仪在稳定的氮气流下吹干,然后用三氯甲烷和甲醇以10:1的比例定容至20mL,再以50℃水浴进行加热,使蜡质完全溶解、混匀,最后加入1mL的内标十七烷备用；

4.2蜡质组分中酯类和脂肪酸的处理方法与分析条件

在酯类分析之前先进行硅烷化衍生反应:吸取500μL已定容备用的蜡质提取液至1.5mL QSP离心管中,真空干燥浓缩4h至完全干燥；加400μL双(三甲基硅基)三氟乙酰胺后放入70℃烘箱进行45min的硅烷化衍生反应,样品经氮吹仪吹干后用正己烷定容至500μL,经0.45μm有机系滤膜过滤至1.5mL进样瓶内,最后进行气相色谱分析，以十七烷作为内标；

酯类物质分析采用气相色谱法；条件如下:DB-35MS弱极性毛细管色谱柱柱温70℃,进样口温度230℃,检测器温度300℃,载气为高纯度N₂；升温程序:初始温度70℃,保持1min,以10℃·min^-1的升温速率升至200℃,然后以5℃·min^-1的升温速率升至300℃,保持30min；

在总脂肪酸分析之前先进行甲酯化,方法如下:吸取500μL已定容备用的蜡质提取液,加入50μL十七烷酸作为内标用氮吹仪吹干,再加入200μL 0.4mol·mL^-1氢氧化钾-甲醇溶液,70℃下水解15min后摇匀,再加入300μL三氟化硼于70℃条件下酯化30min,最后用正己烷定容至500μL；用移液枪吸取500μL上清液至1.5mL进样瓶；

总脂肪酸分析采用气相色谱法；条件:KB-FFAP毛细管色谱柱,柱温70℃,进样口温度230℃,检测器温度300℃；载气为高纯度的N₂；升温程序:初始温度70℃,保持1min,以10℃·min^-1升温速率升至200℃,再以5℃·min^-1升温速率升至230℃,保持20min。