[发明专利]基于对比染色的深部真菌形态学快速检测方法及试剂

权利要求书

1.基于对比染色的深部真菌形态学快速检测方法，其特征在于：它包括如下步骤，

步骤一：无菌处理检测深部真菌所需的器具，并无菌保存检测所需的器具；

步骤二：取静脉血1毫升；

步骤三：先在无菌环境中将一滴未凝固的静脉血滴入盛有0.8ml检测试剂的安瓿瓶中，然后轻摇安瓿瓶直至静脉血在安瓿瓶内呈均匀分布，最后将安瓿瓶静置20分钟，使芝加哥天蓝对静脉血进行染色；

其中，0.8ml检测试剂的制备方法为：先将0.8～1.5克芝加哥天蓝粉剂溶入到100ml无菌生理盐水中，然后将芝加哥天蓝和生理盐水的混合液经一次性针头滤器过滤消毒，接着将芝加哥天蓝和生理盐水的混合液放入到经过无菌处理的安瓿瓶中，最后将带有芝加哥天蓝的无菌生理盐水以每安瓿0.8ml分装于规格为5ml的安瓿瓶中备用；

步骤四：对载玻片和盖玻片进行无菌处理或消毒处理；

其中，对载玻片和盖玻片进行无菌处理或消毒处理的方式可以为如下两种中的一种，其中，第一种对载玻片和盖玻片进行无菌处理或消毒处理的方式为：先在75％酒精溶液中将载玻片和盖玻片浸泡3个小时以上，然后在制片时用酒精灯对载玻片和盖玻片进行燃烧消毒，接着将载玻片和盖玻片放置于直径大于100mm的无菌密封容器中进行冷却，直至染色完成；

第二种对载玻片和盖玻片进行无菌处理或消毒处理的方式为：将载玻片和盖玻片直接放置在超净台中进行紫外线消毒并无菌保存，直至染色完成；

步骤五：用1ml规格的一次性无菌注射器或无菌滴管吸取安瓿内已染色的混合液，在无菌条件下将一滴经过染色的混合液滴于步骤四中的载玻片上，盖上盖玻片；

步骤六：当盖上盖玻片后，先依次通过4倍物镜、10倍物镜、40倍物镜及100倍油镜对载玻片上的混合液进行观察，再由500万以上像素的目镜放大，然后用高分辨率显像软件将载玻片上的混合液的图像显示于电脑屏幕，最后在电脑上对载玻片上的混合液进行观察记录。

2.如权利要求1所述基于对比染色的深部真菌形态学快速检测方法中 所用 的检测试剂，其特征在于：它由芝加哥天蓝粉剂和无菌生理盐水混合而成，所述芝加哥天蓝粉剂与无菌生理盐水的重量比为(0.8～1.5):100，所述的试剂用于对比染色的深部真菌形态学快速检测。

3.根据权利要求2所述的 基于对比染色的深部真菌形态学快速检测方法中所用 的检测 试剂，其特征在于：所述芝加哥天蓝粉剂与无菌生理盐水的重量比为1:100。