[发明专利]基于对比染色的深部真菌形态学快速检测方法及试剂

说明书

本发明公开了一种基于对比染色的深部真菌形态学快速检测方法，涉及一种用于检测深部真菌的方法。它包括对深部真菌检测所需的器具进行无菌消毒和保存方法及无菌操作方法；取被检患者肘静脉血约1ml，在无菌环境中将一滴未凝固的静脉血滴入盛有0.8ml，1％芝加哥天蓝生理盐水溶液的安瓿瓶中稀释15倍并染色，在无菌条件下将一滴经过染色的混合液滴于无菌的载玻片上，盖上盖玻片后工作人员通过显微镜和500万像索以上的电子目镜放大后，用高分辨率显像软件将载玻片上的混合液的图像显示于电脑屏幕进行观察记录。本发明能清晰显示各种活体细胞，可为临床疾病的检测带来革命性的改变。本发明还涉及一种基于对比染色的深部真菌形态学快速检测试剂。

技术领域

本发明涉及一种用于检测深部真菌的方法，具体的说是一种基于对比染色的深部真菌形态学快速检测方法。本发明还涉及一种基于对比染色的深部真菌形态学快速检测试剂。

背景技术

随着近些年来环境污染的不断恶化，真菌感染人群也在不断扩大。真菌感染者由以往的继发感染人群，发展为目前的原发性真菌感染“正常”人群(由环境、职业、过劳等因素诱发)。此外，伴有基础疾病的患者和老年人，如糖尿病患者均为真菌感染的易感人群，现代介入技术及外科手术治疗的广泛应用也给真菌感染创造了条件。

目前，检测深部真菌有以下四种方法：体液直接涂片形态学检测、血清学检测、病原菌基因检测以及病理学检测。

体液直接涂片形态学检测为目前主要的深部真菌检测的方法，主要依靠可获得的体液或分泌物涂片检测及培养鉴定，但由于所获得的体液或分泌物来源于与外界相通的内体表(即管腔黏膜)，无法与空气隔离，易于污染，导致其检测结果特异性差，不能反映深部感染真实情况，且真菌培养耗时长，一般需要2周以上，培养的阳性率极低，不能快速检测而便于后续的临床抢先治疗。

血清学检测包括血清半乳甘露聚糖检测(简称GM试验)和1，3β-D-葡聚糖检测(简称G试验)，其目前已应用于临床深部真菌感染与否的检测及治疗反应的监测，为临床抗真菌的抢先治疗提供了快速有效的依据，但由于其应用受多种因素的影响，容易出现假阳性，且敏感度和检测菌种的覆盖面有限，以及受到医院条件和患者经济条件的限制，使真菌深部感染的检测困难。

病原菌基因学检测亦受多种因素的影响，因其假阳性率高，不能作为确诊的金标准。

病理学检测则往往需要创伤性手段取材致使临床上极少采用。

发明内容

本发明的第一目的是为了克服背景技术的不足之处，而提供一种基于对比染色的深部真菌形态学快速检测方法。

本发明的第二目的是为了克服背景技术的不足之处，而提供一种基于对比染色的深部真菌形态学快速检测试剂。