[发明专利]一种具有改善记忆功效的多肽及其分离制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种具有改善记忆功效的多肽及其分离制备方法和用途，该多肽的氨基酸序列为Tyr‑Ser‑Gly‑Val‑Cys，其分离制备方法包括如下步骤：将凤尾鱼加混合酶酶解后得到酶解液，酶解液上Sephadex G‑25凝胶柱洗脱，收集各洗脱峰并测定其对受损PC12细胞存活率的影响，存活率最高的组分采用反相高效液相色谱进一步纯化，收集各洗脱峰并测定其对受损PC12细胞存活率的影响，存活率最高的组分即为本发明的多肽。本发明采用生物酶解技术及色谱分离技术制备出一种具有明显改善记忆作用的蛋白肽，制备方法简单可行，制得的产品纯度高。

技术领域

本发明属于蛋白质精深加工领域，具体涉及一种具有改善记忆功效的多肽及其分离制备方法和用途。

背景技术

研究表明，阿兹海默症(Alzheimer’s diseases,AD)是一种与年龄相关的神经退行性疾病，其会导致人们在年龄增长的过程中，逐渐丧失认知功能。到目前为止，科研工作者们发现人类退行性疾病的病理非常复杂。在众多病例中，研究对于神经细胞的保护作用已成为人们预防、改善或治疗神经退行性疾病的突破点。

氧化应激加剧或人体机能老化均会损伤人体大脑中神经细胞，从而降低细胞活力。因此，为神经细胞提供营养成分，或添加功能活性成分，从而提高神经细胞的抗氧化、抗炎症能力，增强细胞存活率，对于提高、改善认知能力具有很重要的意义。

另外，部分食物来源活性成分已成为预防和/或治疗神经退行性疾病及抑郁等病症的潜在目标。尤其是对于老年痴呆症，日常饮食治疗更能避免药物干预治疗的不利因素。此外，食物蛋白来源的肽类物质，因具有来源稳定、价格低廉、制备工艺简单、无副作用等优点，逐渐成为人们研究的热点。

发明内容

本发明的首要目的在于提供一种具有改善记忆功效的多肽，其C端至N端的氨基酸序列为Tyr-Ser-Gly-Val-Cys。

本发明的另一目的在于提供上述多肽的分离制备方法。

本发明的再一目的在于提供上述多肽的用途。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种多肽，其C端至N端的氨基酸序列为Tyr-Ser-Gly-Val-Cys；

所述的多肽分子量为527.20Da。

上述多肽的分离制备方法，包括如下步骤：

(1)将凤尾鱼去头去内脏，绞成肉糜，加水混合，加入占肉糜质量0.5～1.2％的混合酶，在45～60℃下酶解6～10h后，灭酶，冷却至室温后，离心，过滤收集滤液，为凤尾鱼酶解液；

步骤(1)所述的加水混合，水与肉糜的质量比为(1～3):1；

步骤(1)所述的混合酶，由木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶组成；其中，木瓜蛋白酶占肉糜质量的0.2～0.5％，碱性蛋白酶占肉糜质量的0.3～0.7％；所述的碱性蛋白酶优选Alcalase 2.4L；

步骤(1)所述的灭酶是将反应物在95℃下加热15min；

步骤(1)所述的离心优选在3500r/min转速下离心10min；

(2)将凤尾鱼酶解液添加至Sephadex G-25凝胶柱，用去离子水以0.5～1.5mL/min的流速进行洗脱，检测波长为220nm，收集各洗脱峰并测定其对受损PC12细胞存活率的影响，选取使得受损PC12细胞存活率最高的洗脱峰所对应的组分进行下一步分离；

(3)采用反相高效液相色谱对步骤(2)选取的目标组分进一步纯化，收集各洗脱峰并测定其对受损PC12细胞存活率的影响，使得受损PC12细胞存活率最高的洗脱组分即为本发明的多肽，其C端至N端的氨基酸序列为Tyr-Ser-Gly-Val-Cys；