[发明专利]一种心脑血管疾病精准用药基因检测固相PCR试剂盒在审
| 申请号： | 201710485408.6 | 申请日： | 2017-06-23 |
| 公开（公告）号： | CN108070646A | 公开（公告）日： | 2018-05-25 |
| 发明（设计）人： | 韦玉军;李航;刘琳琳;苏军 | 申请（专利权）人： | 安徽安龙基因医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883 |
| 代理公司： | 杭州君度专利代理事务所(特殊普通合伙) 33240 | 代理人： | 王桂名 |
| 地址： | 230000 安徽省合肥市庐阳*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 固相PCR 心脑血管疾病 试剂盒 热启动DNA聚合酶 基因检测 混合液 灵敏度 扩增 检测 检测灵敏度 安全用药 非特异性 耗材成本 核酸模板 检测结果 临床检测 临床应用 特异性强 引物序列 定量PCR 引物组 排管 省时 通量 位点 上机 省力 保证 | ||
1.一种心脑血管疾病精准用药基因检测固相PCR试剂盒，其特征在于，包括PCR反应液混合液及12联排管或96孔PCR反应板构成，所述PCR反应液混合液包括引物组、热启动DNA聚合酶和PCR反应缓冲液。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的引物对由20对引物组成，具体如下：
所述检测ACE rs1799752引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.1、SEQIDNO.2所示；
所述检测VKORC1 rs9923231引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.3、SEQIDNO.4所示；
所述检测CYP2C9*3 rs1057910引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.5、SEQIDNO.6所示；
所述检测NAT2 rs1801279引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.7、SEQIDNO.8所示；
所述检测NAT2 rs1801280引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.9、SEQIDNO.10所示；
所述检测MTRR rs1801394引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.11、SEQIDNO.12所示；
所述检测MTHFR rs1801131引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.13、SEQIDNO.14所示；
所述检测MTHFR rs1801133引物对的上下游引物的核苷酸序列SEQIDNO.15、SEQIDNO.16所示；
所述检测ADRB1 rs1801253引物对的上下游引物的核苷酸序列SEQIDNO.17、SEQIDNO.18所示；
所述检测ADD1 rs4961引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.19、SEQIDNO.20所示；
所述检测NPPA-AS1 rs5065引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.21、SEQIDNO.22所示；
所述检测CYP2C19*2 rs4244285引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.23、SEQIDNO.24所示；
所述检测CYP2C19*1/17 rs12248560引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.25、SEQIDNO.26所示；
所述检测PON1 rs662引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.27、SEQIDNO.28所示；
所述检测CYP2C19*3 rs4986893引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.29、SEQIDNO.30所示；
所述检测ALDH2 rs671引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.31、SEQIDNO.32所示；
所述检测CYP2D6 rs1065852引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.33、SEQIDNO.34所示；
所述检测CETP rs708272引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.35、SEQIDNO.36所示；
所述检测GP1BA rs6065引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.37、SEQIDNO.38所示；
所述检测LTC4S rs730012引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQIDNO.39、SEQIDNO.40所示。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的引物的终浓度为200nM-1uM，优选500nM。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的固相PCR试剂盒是将所述的引物组、热启动DNA聚合酶和PCR反应缓冲液固定在96孔PCR反应板或12联排PCR反应孔中的，加样时添加核酸模板进行上级扩增。
5.一种如权利要求1-4任意所述的基于固相PCR试剂盒检测13种心脑血管疾病精准用药检测方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)13种心脑血管疾病精准用药基因检测固相PCR扩增试剂盒的生产；(2)口腔拭子DNA提取试剂盒按照说明书提取核酸；(3)固相PCR扩增反应；(4)PCR产物电泳分析后测序。
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