[发明专利]外周血中分选B淋巴细胞的方法、试剂盒及系统、鉴定血源性淋巴肿瘤细胞的试剂盒及系统

权利要求书

1.一种从外周血中分选B淋巴细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1，采用红细胞密度离心分离介质将外周血细胞中的红细胞去除；以及

S2，使用流式细胞分选法将B淋巴细胞从去除了红细胞的外周血细胞中分选出来。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述红细胞密度离心分离介质在20℃下的比重为1.080～1.081克/毫升，所述红细胞密度离心分离介质包含：硫酸铁、氯化锌、硝酸铁中的一种和蔗糖。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤S1具体包括：将所述外周血离心后去掉血浆，将得到的外周血细胞加入到所述红细胞密度离心分离介质的顶层，离心，收集上层去除了红细胞的外周血细胞。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤S2具体包括：将去除了红细胞的外周血细胞加入荧光标记的抗B细胞表面标示物抗体，孵育，然后洗涤除去未结合的所述荧光标记的抗B细胞表面标示物抗体，使用流式细胞仪分选得到所述B淋巴细胞。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述荧光标记的抗B细胞表面标示物抗体特异性地识别下述人的B细胞表面标示物的一种或多种CD5、CD10、CD15、CD19、CD20、CD22、CD30、CD38、CD43、CD45、CD77、CD79a。

6.一种用于从外周血中分选B淋巴细胞的试剂盒，其特征在于，包括：红细胞密度离心分离介质、缓冲液和荧光标记的抗B细胞表面标示物抗体。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述红细胞密度离心分离介质在20℃下的比重为1.080～1.081克/毫升，所述红细胞密度离心分离介质包含硫酸铁、氯化锌、硝酸铁中的一种和蔗糖。

8.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光标记的抗B细胞表面标示物抗体特异性地识别下述人的B细胞表面标示物的一种或多种CD5、CD10、CD15、CD19、CD20、CD22、CD30、CD38、CD43、CD45、CD77、CD79a。

9.一种用于从B细胞淋巴瘤病人的外周血中分选、提取及鉴定血源性淋巴肿瘤细胞的试剂盒，其特征在于，包括：红细胞密度离心分离介质、缓冲液、荧光标记的抗B细胞表面标示物抗体、荧光标记的抗淋巴细胞肿瘤标示物抗体和染色体倍体检测探针。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述红细胞密度离心分离介质在20℃下的比重为1.080～1.081克/毫升，所述红细胞密度离心分离介质包含硫酸铁、氯化锌、硝酸铁中的一种和蔗糖。

11.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光标记的抗B细胞表面标示物抗体特异性地识别下述人的B细胞表面标示物的一种或多种CD5、CD10、CD15、CD19、CD20、CD22、CD30、CD38、CD43、CD45、CD77或CD79a。

12.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光标记的抗淋巴细胞肿瘤标示物抗体特异性地识别下述一种或多种抗原：ki-67、Bcl-2、Bcl-6、EGFR vIII、C-myc、MUM1、PAX5、OCT2或BOB1。

13.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述染色体倍体检测探针为12号染色体着丝粒探针。

14.一种从外周血中分选B淋巴细胞的系统，其特征在于，包括如权利要求6至8中任一项所述的试剂盒。

15.根据权利要求14所述的系统，其特征在于，所述系统还包括流式细胞分选仪。

16.一种用于从B细胞淋巴瘤病人的外周血中分选、提取及鉴定血源性淋巴肿瘤细胞的系统，其特征在于，包括如权利要求9至13中任一项所述的试剂盒。

17.根据权利要求16所述的系统，其特征在于，所述系统还包括流式细胞分选仪、半自动或全自动免疫分析仪。